抗肿瘤药物的筛选方法.pdfVIP

2005 1 () January 2005 29 1 　　　Journal of Anhui Univer ity Natural Science Edition　　　Vol.29 No.1 抗肿瘤药物的筛选方法 1 1 2 2 李宜明, 沈业寿,王　清,季俊虬 (1. , 　230039;2., 　230088) 　:, 。, 。、 , 。 :;; :K730.5 　　:A　　:1000-2 162(2005)01-0090-07 , , 。 , ,。、 , 。 ,、、, (、 ),。 80 , /P388 L1210 [1] ,。 P388 L1210 , 。 , 。, 1985 NCI , ,。 , : ; ,, ,, 。。 1　 [2] , , [3] [4,5] , RNA , RNA 。 :2004-09-12 :(1981-), , , ; (1949-), , , , . 1 　　　　　　　　　　　　　　, : 9 1 , [6-8] 。, [9] , 。 [7] , (telomeric repeat amplify - caion protocol,TRAP )Kim ,。。 1.1　 1μL TS 0.36μmol/L ,dNTP50μmol,TaqDNA 1 IU,CX 0.28μmol/L ,Mg2 +1.5 mmol ,25μL PCR 。30 ℃ 30 min ,72 ℃30 ,94 ℃30 ,55 ℃30 ,72 ℃30 ,30 。 1.2　 12 %,, 1025 ,180V 2h 。 1.3 　 10 %0.5%35 min , ( 0.2 %),37 ℃5 min ,。(30%NaOH 0 . 1%)DNA , 20 min。 5 min 。。 1.4　 DNA ,, PCR 。DNA 6bp , 。 , [9] 。 , ()。 ,,。 2　 [10] , , 。 , 。FDA[11] (Fluore cein diacetate), , , ,FDA 。,FDA , ,, , 。 2.1　 ,0.25%0.02%EDTA , 4 600-800rpm ,5×10 /mL。3-4 , ,。37 ℃5%CO 。 2 92 　　　　　　　　　　　　() 29 2.2　 , , 0.1ug/mL, 0 .5ug/mL, 1ug/mL, 5ug/mL, 10ug/mL,。 2.3 　 , PBS , 1.8mL/ PBS ,200uL/FDA DMSO (100ug/mL), 10ug/mL,