华东师范大学生物系生化技术总复习.docVIP

名词解释： 【生化技术】在生物化学及其相关学科应用的各种技术统称为生化技术。主要指生物体内物质及其代谢产物，特别是生物大分子如蛋质、核酸的分离、检测、制备与改造技术。 【抽提】是指用适当的溶液（如缓冲液、稀酸、稀碱或有机溶剂如丙酮、乙醇）进行反复萃取，逐步将原料中有效成分最大限度分离出来的过程。 【有机溶剂沉淀法】利用与水互溶的有机溶剂(如甲醇、乙醇、丙酮等)能使蛋白质在水中的溶解度显著降低而沉淀的方法，称为有机溶剂沉淀。其原因有二，一是具有脱水作用，二是有机溶剂的介电常数比水导致溶剂的极性变小。 【吸附柱层析】是以固体吸附剂为固定相，以有机溶剂或缓冲液为流动相构成柱状的一种层析方法。常用吸附剂有极性和非极性两种。前者有羟基磷灰石、硅胶、氧化铝和人造沸石等，后者有活性炭等。这种层析方法已成为科研、医学、化工及发酵等部门常规使用的一种分离手段。 【凝胶过滤层析】使用有一定大小孔隙的凝胶作层析介质(如葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等)，利用凝胶颗粒对分子量和形状不同的物质进行分离的层析技术。由于各种分子的大小、形状不同，扩散到凝胶孔隙内的速度不同，因而通过层析柱的快慢不同而分离。 【高效疏水层析】利用适度疏水性的填料，以含盐的水溶液作为流动相，借助于疏水作用分离活性蛋白质的液相层析法称为高效疏水层析。 【毛细管电泳】以毛细管为分离通道、高压电场为驱动力的电泳分离分析法。包括毛细管自由流动电泳、毛细管区带电泳等。 在高电场强度作用下，毛细管中的待测物质可按其分子质量、电荷、淌度等因子的差异得到有效的分离。 【等电点聚焦电泳】即电聚焦电泳法，是在一定抗对流截肢（如凝胶）中加入载体两性电解质，当直流电通过时，形成一个由阳极到阴极pH逐步上升的梯度。两性化合物在此电泳过程中，就被浓集在与其等电点相等的pH区域，从而使不同化合物能按其各自等电点得到分离。 【离子交换层析】是以离子交换剂为固定相，液体为流动相的系统中进行的。样品中待分离的溶质离子，与固定相上所结合的离子交换，不同的溶质离子与离子交换剂上离子化的基团的亲和力和结合条件不同，洗脱液流过时，样品中的离子按结合力的弱强先后洗脱。在生物化学和分子生物学领域此法常用于分离蛋白质、核酸等生物大分子。 【高效反相层析】利用非极性烷基固定相作为填料，以含有机改性剂（如异丙醇）的水溶液作为流动相，借助于疏水效应分离蛋白质或核酸的液相层析法。 【亲和层析】以亲和吸附剂作为固定相，以特异性溶液为流动相，对配体（L）具有亲和力之有效成分（S）进行分离的过程。即利用分子与其配体间特殊的、可逆性的亲和结合作用而进行分离的一种层析技术。可以选用生物化学、免疫化学或其他结构上吻合等亲和作用而设计的各种层析分离方法。 【生物传感器】利用固定化的生物敏感材料(如酶、蛋白质、DNA、抗体、抗原、生物膜、微生物、细胞等)作为识别元件，与适当的理化换能器（如氧电极、光敏管、场效应管、压电晶体等等）及信号放大装置构成的分析工具或系统，将生化反应转变成可定量的物理、化学信号，从而能够进行生命物质和化学物质检测和监控的装置。 【PCR】即聚合酶链式反应，是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。 【芯片实验室】也称微全分析系统或微流控芯片。它是采用微电子工业和半导体制造业中的一些精细工艺，在硅片、玻片和塑料等表面经过必要的物化处理后，加工出微细（微米级）结构，制作成一块几平方厘米的、新兴的生物芯片，可进行化学或生物化学的实验程序。 【层析】是以基质为固定相（柱状或薄层状），以液体或气体为流动相，使有效成分和杂志在这两个相中连续不断、反复多次地进行分配或交换、吸附作用，最终达到分离混合物的目的。常用几种溶液有平衡液、洗涤液和洗脱液。 【固定化酶】是用适当的物理、化学方法，把粗制的或纯化的酶固定于某一空间内，使其成为既保持了本身的特性，又能在连续反应之后可以回收和重复使用的一种制品。 【细胞凋亡】即程序性细胞死亡，是细胞通过内在的程序来决定其死亡的，常常是生理性的。 【电渗现象】在电场的影响下，带电荷的液体对携带相反电荷的固定介质进行相对运动的现象。可以改变带电离子在电泳中的移动速度甚至方向。免疫对流电泳中也利用了电渗现象。 选择题中的计算公式 （P99）【分配系数Kav】 Kav=Ve-Vo/Vt-Vo Ve：分离物体本身的洗脱体积 Vo：外水体积 Vt：凝胶床总体积 备注：在固定相和层析柱体积已确定时，Vt和Vo都为恒定值，Ve随分离物分子质量的变化而变化（反关系）。 （P328）【总浓度T%；交联度C%】 T%=a+b/v；C%=b/a+b a：单体——丙烯酰胺重量（g） b：双