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黄曲霉毒素检测方法研究进展 摘要：黄曲霉毒素(AFT)是迄今发现的毒性最强的一类生物毒素,有AFB1、AFB2、AFG1、AFG2等多种形式,对人和动物有强烈的毒性,为对AFT的检测工作提供方便,特对AFT的危害及目前的检测方法进行了综述。 关键词：黄曲霉毒素;危害;检测方法 黄曲霉毒素（AFT）是一类化学结构类似的化合物，均为二氢呋喃香豆素的衍生物。它是20世纪60年代初发现的一种真菌的有毒代谢产物,由曲霉属中的黄曲霉和寄生曲霉所产生。1993年黄曲霉毒素被世界卫生组织(WHO)的癌症研究机构划定为1类致癌物,它的毒性极强，对人及动物肝脏组织有破坏作用,严重时可导致肝癌甚至死亡。近年来,AFB1污染事件的发生,已引起世界各国及消费者对食品安全的关注[1-3]。世界各国对黄曲霉毒素的检出标准都做了严格的规定。1995年,世界卫生组织制定的食品黄曲霉毒素最高允许浓度为15ug/kg. 因此,对AFT的检测不仅关系到动物的安全,更直接影响到人们的身体健康和生命安全,以下对AFT的危害及检测方法作一综述。 1黄曲霉毒素的理化性质及其危害 1.1黄曲霉毒素的理化性质 黄曲霉毒素(Aflatoxins)是一组化学结构类似的化合物,目前已分离鉴定出12种包B1,B2,G1,G2,M1,M2,P1,Q,H1,GM,B2a和毒醇。黄曲霉毒素的的基本结构为二呋喃环和香豆素,B1是二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物。即含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮(香豆素)。前者为基本毒性结构,后者与致癌有关。M1是黄曲霉毒素B1在体内经过羟化而衍生成的代谢产物。黄曲霉毒素的主要分子型式含 B1,B2,G1,G2 ,M1,M2等.其中M1和M2 主要存在于牛奶中[4-5]。B1为毒性及致癌性最强的物质。 AFT在紫外线下发特定的荧光,根据荧光颜色不同,将其分为蓝紫色荧光的B族和黄绿色荧光的G族两大类及其衍生物。在紫外线下,黄曲霉毒素B1、B2发蓝色荧光,黄曲霉毒素G1、G2发绿色荧光。黄曲霉毒素的相对分子量为312~346,在水中的溶解范围为10~20 mg/L,易溶于油,可大量溶解于氯仿、甲醇、乙腈、二甲基亚砜等中等极性的有机溶剂中,但不溶于石油醚、己烷和乙醚中。一般在中性溶液中较稳定,但在强酸性溶液中稍有分解,在pH9~10的碱性溶液中分解迅速, 同时易被强氧化剂分解。其纯品为无色结晶,耐高温,黄曲霉毒素B1的分解温度为268℃,紫外线对低浓度黄曲霉毒素有一定的破坏性。在自然条件下,食品中AFT稳定性很强。被AFB1污染的稻谷,室温下自然存放可长达20多a[6] 1.2黄曲霉毒素的危害 黄曲霉毒素对人类健康的危害主要是由于人们食用被黄曲霉毒素污染的食物,途径有二,其一是由受黄曲霉毒素(主要为B1)污染的植物性食物摄入,其二是经饲料而进入奶或乳制品(包括乳酪、奶粉等)的黄曲霉毒素(主要为M1)。 黄曲霉毒素B1的半数致死量为0.36 mg/kg体重,属特剧毒的毒物范围(动物半数致死量10 mg/kg,它的毒性比氰化钾大10倍,比砒霜大68倍),它引起人的中毒主要是损害肝脏,发生肝炎、肝硬化、肝坏死等。临床表现有胃部不适,食欲减退,恶心,呕吐,腹胀及肝区触痛等;严重者出现水肿,昏迷,以致抽搐而死。黄曲霉毒素是目前发现的最强的致癌物质,其致癌力是奶油黄的900倍,比二甲基亚硝胺诱发肝癌的能力大75倍,比3,4-苯并芘大4000倍,它主要诱使动物发生肝癌,也能诱发胃癌、肾癌、直肠癌及乳腺、卵巢、小肠等部位的癌症。 亚洲和非洲的疾病研究机构的研究工作表明:食物中黄曲霉毒素与肝细胞癌变(Liver Cell Cancer,LCC)呈正相关性,长时间食用含低浓度黄曲霉毒素的食物被认为是导致肝癌、胃癌、肠癌等疾病的主要原因。中国医科院肿瘤医院明利华教授课题组首次确定了黄曲霉毒素使乙肝患者患肝癌的累积暴露剂量为0.13~0.49mg/kg体重,这仅为在实验条件下,给无乙肝感染的恒河猴喂食黄曲霉素使之致肝癌所需累积剂量的1/700,确立黄曲霉素是常见肿瘤——肝细胞癌的重要的辅助病因。1988年国际肿瘤研究机构(International Agency for Research on Cancer,IARC)将黄曲霉毒素B1列为人类致癌物。除此以外,黄曲霉毒素与其他致病因素(如肝炎病毒)等对人类疾病的诱发具有叠加效应[4,7-8]。 黄曲霉毒素对人和动物健康的危害均与黄曲霉毒素抑制蛋白质的合成有关,黄曲霉毒素分子中的双呋喃环结构是产生毒性的重要结构,研究表明黄曲霉毒素的细胞毒作用可干扰信息RNA和DNA的合成,进而干扰细胞蛋白质的合成,导致动物全身性损害。 2.黄曲霉毒素的检测方法 黄曲霉毒素的分析方法从最初以薄层层析法为主，发展到高效液相色谱法、微柱法、酶联免疫吸附法等多种普遍应用，