代谢工程方法改造大肠杆菌生产胸苷-微生物学报.pdfVIP

生 物 工 程 学 报 李思梦 等/代谢工程方法改造大肠杆菌生产胸苷 105 Chinese Journal of Biotechnology /cjbcn January 25, 2015, 31(1): 105−114 DOI: 10.13345/j.cjb.140196 ©2015 Chin J Biotech, All rights reserved 工业生物技术 李思梦 ，李晓静 ，陈涛1 2 1 1 300072 2 300072 , , . . , 2015, 31(1): 105–114. Li SM, Li XJ, Chen T. Metabolic engineering of Escherichia coli for thymidine production. Chin J Biotech, 2015, 31(1): 105–114. 摘 要: 胸苷是抗艾滋病药物司他夫定 (3 ′-脱氧-2′,3′-双脱氢胸苷) 和叠氮胸苷的重要前体物质。应用代谢工 程方法对大肠杆菌Escherichia coli BL21 (DE3) 生物合成胸苷进行了研究。通过敲除E. coli BL21 嘧啶回补途径 的deoA 、tdk 和udp 三个基因，BS03 工程菌株能够积累21.6 mg/L 胸苷。为了增加合成胸苷前体物核糖-5-磷 酸和NADPH 的供给，进一步敲除pgi 和pyrL 使工程菌BS05 胸苷的产量提高到 90.5 mg/L 。而通过过表达胸 苷合成途径的ushA 、thyA 、dut 、ndk 、nrdA 和nrdB 六个基因，菌株BS08 胸苷的产量能达到272 mg/L 。通过 分批补料发酵，BS08 最终可以积累 1 248.8 mg/L 的胸苷。本研究结果表明经过代谢工程改造的E. coli BL21 具有良好的胸苷合成能力和应用潜力。 : 代谢工程，胸苷，从头合成途径 Metabolic engineering of Escherichia coli for thymidine production 1 2 1 Simeng Li , Xiaojing Li , and Tao Chen 1 Key Laboratory of Systems Bioengineering of Ministry of Education, School of Chemical Engineering and Technology, Tianjin University, Tianjin 300072, China 2 College of Sevice, Naval University of Engineering, Tianjin 300072, China Abstract: Thymidine is a commercially useful precursor for production of antiviral compounds such as stavudine and Received: April 1, 2014; Accepted: May 19, 2014 Supported by: National Basic Research and Development Program of China (973 Program) (Nos. 2011CBA00804, 2012CB725203). Corresponding author: Chen Tao. Tel: +86-22 E-mail: che