酶的研究与应用-高中三年级生物课件.pptVIP

生物技术实践;一、酶的制备及其活力测定 1.果胶酶的制备 (1)原理：细胞壁是原生质体生命活动的产物，是植物细胞周围没有生命的部分，具有一定的坚韧性。果胶是植物细胞壁的主要成分，由半乳糖醛酸聚合而成。果胶酶是分解果胶的多种酶的总称。广泛存在于植物果实和微生物中。 (2)方法步骤： 制果泥→过滤→离心→取上清液，调pH为3~4，0~4℃保存;2.酶活力测定 酶活力也称酶的活性，是指酶催化一定化学反应的能力。通常用酶促反应的速率即酶促反应过程中单位时间内底物的减少量或产物的生成量来表示。 3.影响酶活性的因素 (1)温度对酶活性的影响 ①原理：酶的活性受温度的影响，酶促反应都有一个最适温度。在低于最适温度时，随温度升高，酶活性增强；当高于最适温度时，随温度的升高，酶的活性减弱以至消失。;②操作步骤： 制作苹果泥→分类→苹果泥及果胶酶放在不同温度水浴恒温→果胶酶加入对应的试管中→保温一段时间→过滤→观察比较 ③注意事项 a.本实验为对照实验，因此每个试管中苹果泥的量及果胶酶的量都要相等。 b.由于温度影响酶的活性，因此，苹果泥和果胶酶都应先放到对应温度的水中恒温处理，使它们的温度都达到实验设定的温度，然后再混合进行化学反应。 c.温度梯度越小，实验结论越精确。;(2)酸碱度对酶活性的影响 ①原理：酶分子上有许多酸性、碱性氨基酸的侧链基团，这些基团随着pH的变化可处于不同的解离状态，进而影响酶的活性。 ②操作步骤 制备苹果泥→分装→调pH→反应→反应一段时间→过滤→观察比较;③注意事项 a.本实验是对照实验，其变量是pH。因此，每个试管内加入的苹果泥的量及果胶酶的量应相等，温度也应相同且适宜，反应时间相同。 b.本实验可以通过观察果汁的体积大小来判断酶活性的高低，也可观察果汁的澄清度来判断果胶酶活性的强弱。;4.探究果胶酶的用量 (1)原理 在底物足够，其他条件不变的条件下，反应系统中不含有抑制酶活性的物质及其他不利酶发挥作用的因素时，酶促反应的速度与酶浓度成正比。 (2)操作过程 制备果汁→配制不同浓度的果胶酶溶液→取1~6号烧杯，向1号烧杯加蒸馏水1 mL，向2~6号烧杯分别加入1 mL质量为2 g/L、4 g/L、6 g/L、8 g/L、10 g/L的果胶酶溶液→向6只烧杯中加入等量的苹果泥→45 ℃水浴恒温5min→沉淀→过滤→测量澄清滤液体积→计算澄清苹果汁出汁率→结论。;(3)注意事项 a.制备苹果匀浆后，迅速加热，使苹果匀浆中酶变性失活。 b.由于Fe3+、Ca2+、Zn2+等金属离子对果胶酶有抑制作用，所以在实验过程中不用金属容器。 c.如果随着酶浓度或酶量的增加，过滤得到的果汁的体积也增加，说明酶用量不足；当酶的浓度增加到一定程度时，过滤得到的果汁体积不再增加，说明酶的用量已经足够，那么使果汁的量不再增加的最低酶的用量就是酶的最适用量。;二、酶在洗涤方面的应用 1.原理 加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉。目前常用的酶制剂有四类：蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶和纤维素酶。其中应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。碱性蛋白酶能将血渍、奶渍等含有的大分子蛋白质水解成可溶性氨基酸或小分子肽，其他酶同样可以将大分子的物质水解成小分子的物质，使污迹容易从衣物上脱落。;2.试验设计注意事项 (1)实验中注意控制变量。 (2)探讨加酶洗衣粉最适温度的实验中，根据实际生活中的情况，温度梯度可以进一步设置为20 ℃、30 ℃、40 ℃等，若测出40 ℃的洗涤效果最好，应设置更细的实验组，直至测出具体的最适温度。 (3)使用加酶洗衣粉时不但要考虑最佳洗涤效果的条件，如最适温度；还要考虑衣物的承受力，如蛋白酶洗衣粉不能洗涤丝绸类衣物；也要考虑洗涤成本问题，因污渍的成分比较复杂，一般选择复合加酶洗衣粉，以减少用量。;1.影响酶活性的因素;2.加酶洗衣粉使用的注意事项： (1)蛋白质类纤维(如毛、皮、丝等)衣物不能用加酶洗衣粉来洗涤； (2)因为此类洗衣粉能分解人体皮肤表面蛋白质，而使人患过敏性皮炎、湿疹等，因此，应避免与这类洗衣粉长期接触； (3)使用加酶洗衣粉时，注意洗涤用水的温度。碱性蛋白酶在35～50℃时活性最强，在低温或70℃以上就会失效。 (4)加酶洗衣粉不能长期存放，否则会导致酶活力降低。; ;　　酶的活性受温度的影响。酶都有一个最适温度，但果胶酶的最适温度是45~50 ℃，而不是0~4 ℃。保存果胶酶时，降低温度，使其活性降低，但酶并不失活，当温度恢复到适宜时，酶的活性也处于最高。;　　　下图纵坐标为果胶酶促反应速度，横坐标为底物浓度，其中能正确表示酶量增加1倍时，底物浓度和反应速度关系的是( );　　用加酶洗衣粉洗涤衣物时，下列说法正确的是（双选）(　 ) A.加酶洗衣粉不能用于洗涤毛料衣服