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中文摘要
除的青少年恒牙。采用改良组织块法体外培养牙髓细胞(hDPCs),倒置相差显
微镜下观察细胞形态。收集第二代hDPCs,利用免疫荧光法鉴定细胞组织来源。
收集生长稳定的第三代hDPCs绘制细胞生长曲线图。
2.临床收集因正畸治疗拔除的健康完整第一前磨牙,利用高速涡轮手机,
金刚砂车针和机用根管锉制备单一牙本质小体。通过超声清洗,梯度脱矿,灭
菌等系列操作处理牙本质。将处理过的牙本质转入含双抗的基础培养基中孵育
24dx时,收集培养液即为脱矿牙本质(Ⅱ)M)提取液,保存于4C冰箱中备用。
DMP。1的释放情况。
3.设置实验组与对照组。实验组用TDM浸提液诱导培养hDPCs,对照组用
timePCR
普通DMEM培养基替代。CCK-8法比较两组细胞的增殖活性。采用real
达情况。
结果
1.共收集牙髓组织标本30个,长出原代6瓶,成功率为20%,传至第3
代以上因污染断代3瓶。体外培养牙髓细胞3-4天可以观察到有细胞从组织块
游出,10天左右可以爬满盖玻片。细胞大部分为长梭形成纤维细胞样形态,少
部分呈多角形、星形。成涡轮状或束状排列。细胞免疫荧光结果显示hDPCs阳
约呈“S”形,从第3天进入指数生长。
柱状小体,表面形态光滑。利用酶联免疫吸附剂测定脱矿牙本质基质和普通牙
time
性高于对照组。Real
OCN、BSP、DSPP及DMP.1表达显著高于对照组。
结论
1.改良组织块法培养人牙髓原代细胞简单易操作,并且成功率较高。
II
中文摘要
2.梯度脱矿的方法能充分暴露的牙本质小管,有利于生物活性因子的释放。
3.以浸提的方式能有效收集牙本质细胞外基质分子。脱矿牙本质基质提取
液可以体外诱导牙髓细胞向成牙方向分化。
关键词:牙髓细胞;牙本质;牙髓牙本质复合体;牙组织工程学
III
Abstract
Researchon
theeffectoftreateddentinmatrixonhuman
cells
pulp
Postgraduate:NaDng
Tutor:WdHe
Oral
of andMaxillofacialoftheFirstAffiliatedof
Department Surgery Hospital
450052
ZhengzhouUniversity,Zhengzhou
Abstract
Background:
Atpresent,direct isthemostcommonmethodtoreservethe
pulpcapping
inclinic.Direct withcalcium isthe
exposedpulp pulpcapping hydroxidegolden
standardanditis usedinclinical inrecent the
widely practice years.Butlong-term
studiesshowthatthe
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