食用菌育种学-绪论.ppt

多数真核生物（酵母除外）的mRNA 3’末端具有长约200 bp的poly（A）尾巴。 poly（A）尾巴不是由模板DNA所编码，而是在转录后由RNA末端腺苷酸转移酶催化下，以ATP为前体，添加到mRNA的3’末端形成的。 3’尾巴结构 有些mRNA的3’末端没有poly（A）尾巴，如组蛋白的mRNA，其3’末端的正确形成依赖于RNA本身形成的茎环结构，即转录终止于此处。 对茎环结构进行突变，只要是维持其二级结构，就不影响转录的终止。说明二级结构所提供的信息比序列本身更重要。 真核细胞mRNA前体 加尾反应模式图 mRNA的基因在低等真核生物中只有少数含有内含子，为不连续基因。随着进化程度的增高，不连续基因的数目不断增加。 细胞核中有一类RNA，十分不稳定，平均长度比mRNA要长，序列的复杂程度非常高，称为核内不均一RNA（ heterogeneous nuclear RNA，hnRNA ）。 核基因mRNA的剪接 hnRNA以与蛋白质结合的状态存在，形成hnRNP（核糖核蛋白颗粒）。体外研究表明，hnRNP的形状为一个球体和一个与之相连的纤维状结构。 在RNA转录生成以后，在核内完成加帽和加尾的同时，内含子的去除即剪切过程也在进行。然后RNA转运到胞浆。 核基因mRNA的剪接 左（5’）剪接点称为供体位点，右（3’）剪接点称为受体位点。点突变研究证明，剪接位点GT或AG的突变均可以阻止剪接的出现。 几乎所有的真核细胞核基因的内含子均遵循GU－AG规则，这也暗示这类内含子存在着共同的剪接机制。但线粒体、叶绿体和酵母tRNA的内含子不遵循这一规则。 核基因mRNA的剪接 核RNA的剪接点及周围并没有自身的互补序列，5’剪接点总是能正确地与3’剪接点相连。 剪接位点具有通用性，而内含子的其他序列（包括二级结构）不提供特定的信息，对剪接不产生影响。剪接装置没有组织特异性，RNA只要含有正确的剪接点，在任何细胞中都可以正确地剪接。 核基因mRNA的剪接 * 3、杂交育种 20世纪50年代后 以基因重组为基础 把不同菌株的优良性状集中于重组体中 2002年出现的基因组改组育种为其特例 * 4、代谢控制育种 20世纪50—70年代 理性（筛选手段） 以诱变育种为基础，获得各种解除或绕过了微生物正常代谢途径的突变株，从而人为地实现有用产物选择性大量生成和积累 * 6 分子育种 20世纪70年代 包括基因工程、分子定向进化等 四、微生物的遗传物质 染色体的组成与结构 DNA的一级、二级和三级结构 ???? 细胞核中能被碱性染料强烈着色的物质，染色质是真核细胞的遗传物质在分裂间期存在的形式，而染色体是细胞在有丝分裂或减数分裂过程中，由染色质聚缩而成的棒状结构。两者是细胞周期不同阶段两种可以相互转变的结构。 一般来说，只有在细胞有丝分裂过程中，才能在光学显微镜下观察到染色体。 整个细胞周期都能观察到染色体？ 非分裂期的细胞核经低渗处理、溶胀破裂后释放出染色质，在电子显微镜下呈纤维串珠状的长丝。 染色质和染色体： 20世纪70年代 真核细胞染色体的组成与结构 呈酸性，种类和含量不稳定；作用还不完全清楚，可能与染色质结构调节有关，在DNA遗传信息的表达中有重要作用 少量的RNA ，不到DNA的10% DNA： 蛋白质：约为DNA的两倍 约占30%，每条染色体一个双链DNA分子 ；是遗传信息的载体，也就是所谓的遗传物质 组蛋白： 呈碱性，结构稳定；与DNA结合形成核小体、维持染色质结构，与DNA含量呈一定的比例 非组蛋白： 真核细胞染色体的组成与结构 组蛋白的特点： 富含两种碱性氨基酸（赖氨酸和精氨酸） 根据凝胶电泳性质可将组蛋白分为五种小类型:H1、H2A、H2B、H3、H4 在细胞周期特定时间可发生甲基化、乙酰化、磷酸化、泛素化和ADP核糖基化等。H3、H4修饰作用较普遍，H2B有乙酰化作用、H1有磷酸化作用。 所有这些修饰作用都有一个共同的特点，即降低组蛋白所携带的正电荷。 这些组蛋白修饰的意义：一是改变染色体的结构，直接影响转录活性；二是核小体表面发生改变，使其他调控蛋白易于和染色质相互接触，从而间接影响转录活性。 组蛋白修饰的种类及其生物学意义 C值反常现象（C值矛盾）（C-value paradox） 单顺反子 重复序列 断裂基因 真核生物基因组的特点： C值反常现象（C-value paradox） 在真核生物中，物种进化的复杂程度与DNA含量C值并不完全一致，称之为C值矛盾(C value paradox)。 通常是指一种生物单倍体基因组DNA的总量。在真核生物中，C值一般是随生物进化而增加的，高等生物的C值一般大于低等生物。 C值反常现象： 一些植物和两栖类动