腰椎损伤疝出型间盘组织JNK信号通路激活情况及免疫学因素探讨.docx

第六届《中华骨科杂志》论坛·基础与骨病腰椎损伤疝出型问盘组织JNK信号通路激活 第六届《中华骨科杂志》论坛·基础与骨病 腰椎损伤疝出型问盘组织JNK信号通路激活 情况及免疫学因素探讨 李鹏飞1马信龙2王涛1 田鹏2韩超2臧加成2孔敬波1 1天津医科大学总医院天津300052 2天津市天津医院天津300211 【摘要】目的：明确ⅢK信号转导通路在损伤疝出型腰椎间盘突出症中激活情况及免疫学因素探讨。方法：选 择24例天津市天津医院脊柱外科收治的腰椎间盘突出症患者，收集手术摘除的髓核组织，根据影像学检查及术中所 见纤维环是否破裂分为12例单纯突出型和12例损伤疝出型，所有标本根据其影像资料按照改良Pi岱朐锄评分系 统进行分级以评价椎间盘的退变程度并进行脏染色；TIn咂L染色分析凋亡情况；westem blot技术检测标本中ⅢK 信号通路的激活情况。结果：标本脏染色切片中发现损伤疝出组出现炎性细胞浸润比例多于单纯突出组，差异有统 计学意义(P<0．05)；改良的Pim砌all评分相同的情况下，损伤疝出组髓核细胞凋亡计数明显多于单纯突出组，差 异具有统计学差异(P<0．05)；．烈K蛋白在损伤疝出组激活程度明显高于单纯突出组，差异均有统计学意义。结论： JNK信号通路在损伤疝出型腰间盘突出症发病机制中发挥重要作用，其可能机制是肿(信号通路和髓核疝出引发的 自身免疫反应相互作用的结果。 【关键词】腰椎；椎间盘移位；ⅢK信号通路；免疫学因素 腰椎间盘突出症(Lumbar disc hemiation，LDH)是腰间盘在退变基础上受到外力作用而发生纤维 环破裂，髓核突出刺激或压迫神经根、脊链等组织所引起的腰痛，并伴有放射性坐骨神经痛等症候 群的一种骨科常见病，其发病机制存在争议，机械压迫学说【l】、化学性神经根炎学说12J以及自身免疫 学说[3】是目前存在的三个热点学说，其中自身免疫学说越来越被广大学者所接受，但其详细机制尚 不明确。c—JuIl氨基末端激酶f c—Jull N．ten_Ilinal l【ina se，ⅢK)是促分裂原活化蛋白激酶家族成员之一， 研究证实细胞因子、应激、生长因子等可以激活卟Ⅸ通路，调节细胞的增殖、凋亡、分化，并在许 多疾病中发挥重要作用【4]。最新研究发现，ⅢK通路可通过TCR依赖的仆K1调节CD8+T细胞，增 强肿瘤的免疫监控【5]，具有抑制肿瘤的作用。研究已证实卟K信号通路在椎间盘退行性改变中发挥 重要作用【6】，其是否在损伤疝出型椎间盘中异常表达需要进行验证。 1资料与方法 1．1临床资料选择24例天津市天津医院脊柱外科收治的腰椎间盘突出症患者，收集手术摘除的 髓核组织，根据影像学检查及术中所见纤维环是否破裂分为12例单纯突出型和12例损伤疝出型， 分别为对照组和观察组，其中对照组男性7例，女性5例，年龄(54．17士11．36)岁，L2／3 l例，L4／5 7 例，L5／sl 4例，观察组男性8例，女性4例，年龄(41．83士13．55)岁，L4／5 6例，L5／sl 6例。所有患 者排除结核、肿瘤及自身免疫性疾病病史。 1．2实验方法所有标本根据其影像资料按照改良Pi伍彻ann评分系统17J评价椎问盘的退变程度 638 第六届《中华骨科杂志》论坛·基础与骨病并进行胍染色；选择两组中中等退变程度的椎间盘进行1UNEL染色分析凋亡情况及w．es“洳blot 第六届《中华骨科杂志》论坛·基础与骨病 并进行胍染色；选择两组中中等退变程度的椎间盘进行1UNEL染色分析凋亡情况及w．es“洳blot 技术检测标本中JNK蛋白和pⅢK蛋白的激活情况。 1．3统计学处理采用SPSSl8．0软件进行数据处理，计量资料用(i±s)表示，两组间比较 采用独立样本t检验，计数资料组间比较采用f检验，相关性采用直线相关分析，以P<o．05为差 异有统计学意义。 2结果 2．1改良的Pimrrm柚评分系统退变程度分级 对照组：4级2例，5级4例，6级4例，7级1例，8级1例。观察组：2级1例，4级2例， 5级4例，6级4例，7级1例。对全体标本的年龄和退变程度进行相关性分析，标本退变分级与患 者年龄存在正相关性pearson相关系数为0．1819(图1)，具有统计学意义(p<0．05)。 我们定义退变5，6级为中等程度退变，其椎间盘呈完全低信号，而间盘高度正常或者轻微减少 (<30％)。退变组中等程度退变患者年龄为(50．38士10．47)，疝出组患者年龄为(43．63士14．77)。对 两组标本的中等退变标本患者年龄进行独立样本t检验，差异不具有统计学意义(P>0．05)。后续的 Ⅱ肥L染色和Westem blot中主要检测中等程度退变椎间盘标本，其中对照组5例，观察组3例， 这样排除了退变因素和年龄因素对两组结果的影响。 繇