MicroRNA及其在黑素瘤中作用的新认识.docVIP

PAGE PAGE 1 MicroRNA及其在黑素瘤中作用的新认识 　　【摘要】MicroRNA（miRNA）是一类长约18～22个核苷酸的单链非编码小分子。在转录后水平参与调控靶基因的表达，其在细胞生长、增殖、代谢及肿瘤形成等一系列生物学过程中发挥重要作用。miRNA具有癌基因和/或抑癌基因的双重作用并具有组织特异性和时序特异性。miRNA的异常表达被认为与黑素瘤的发生发展密切相关。黑素瘤是严重危害患者健康和生命的疾病，其病死率高，晚期患者5年生存率 　　【关键词】MiRNA；生物学特征；肿瘤生成与作用机制；黑素瘤 　　黑素瘤（melanoma）又称恶性黑素瘤（malignantmelanoma，简称恶黑）是最具侵袭性的一种高度恶性、易远处转移的皮肤肿瘤[1]，起源于黑素细胞，多发生于皮肤，亦可见于皮肤黏膜交界处、眼球脉络膜和软脑膜等处，死亡率高。早期恶黑以手术治疗为主，预后较好，晚期转移性恶黑因对放疗，化疗及生物治疗均不甚敏感，其中位生存期6～9个月，5年生存率 　　1miRNA的生物学特征及其生成与作用机制 　　近年来，miRNA已成为生命科学研究的热点，自1993年在果蝇中发现第一个miRNA以来，迄今已有15172个miRNA相继在脊椎动物、蠕虫、果蝇、植物和病毒等142个物种被发现，通过克隆技术（cloningtechnology）、深度测序（deepsequencing）以及复杂的生物信息学和遗传筛选等方法，发现并鉴定人类基因组织中可能存在约1000个miRNA，调节人类近30%基因表达。约有超过50%的miRNA定位于肿瘤相关的脆性位点（fragilesite）[6-7]。参与生命过程中一系列重要进程，包括发育、繁殖、分化和凋亡等。 　　1.1miRNA的生物学特征（1）是一组内源性非编码，长度为18～22nt的单链小分子，广泛存在于动、植物及病毒等的真核细胞中，具有高度保守性，其本身不具有开放阅读框架。（2）结构上，miRNA为单链结构，在3’端有1～2个碱基的长度变化，5’端有一磷酸基团，3’端为羟基，该结构所具有的特点使其与功能RNA的降解片段和大多数寡核苷酸保特区别。（3）miRNA具有较强的同源性，来自不同基因簇的RNA同源性较弱，其表达具有组织特异性和时序特异性[7]。 　　1.2miRNA的生成及作用机制MiRNA的生成过程包括转录、加工成熟及功能复合体装配等主要程序。近期研究表明，miRNA的生成和作用大致经历两个阶段[8]，即RNA聚合酶2作用于miRNA基因，转录生成初级miRNA（pri-miRNA），再由RNA聚合酶3-Dorsha-DGCR8复合体切割形成前体miRNA（pri-miRNA），在细胞内完成；聚合酶3、旋解酶及核酸酶Dicer（属于Rnase3家族）共同作用于pre-miRNA，将其剪切为双链miRNA，随后双链miRNA被降解，一条5’端不稳定的链被结合到核蛋白复合体并参与形成由RNA诱导的沉默复合体（RNA-inducedsilencingcompley，RLSC）[9]，另一条链随即被降解，进入RLSC的miRNA直接与Ago（Argonaute）家族的蛋白质结合，作为“向导”分子介导RLSC剪切靶基因mRNA使其降解或结合到靶基因mRNA的3，UTR（3’端非翻译区）翻译，从而在生物学过程中发挥多种功能[7]。 　　2miRNA在肿瘤发生发展中的作用 　　miRNA通过靶基因3’UTR序列结合，以抑制翻译或降解miRNA的两种方式，在转录后水平调控基因表达，其与肿瘤的发生发展有着密切的关系。虽然大约逾半数的miRNA在基因组上定位于与肿瘤相关的脆性位点，但表观遗传学（epigenetics）的调控及miRNA的单核苷酸的多态性（SNP）均参与了肿瘤发生过程中miRNA的表达变化，亦是肿瘤发生发展的重要因素。研究表明，通过调控靶基因的表达，miRNA参与一系列生理病理过程，包括调节细胞自我更新、凋亡、干细胞分化和肿瘤的发生及转移等[10]。miRNA在肿瘤中的异常表达有两种表现，即上调和下调miRNA，从而发挥癌基因和抑癌基因的双重作用。Calin等[11]认为，miRNA可通过类似癌基因和抑癌基因的作用参与肿瘤发生发展和转归过程。具有癌基因作用的miRNA通常处于静止或低表达状态，其活化可导致癌变，在肿瘤组织中，某些miRNA表达水平明显上调表现出癌基因的特征，如miR-21、miR-221、miR-222类似癌基因的功能[12]；具有抑癌基因作用的miRNA可抑制细胞的过度生长和繁殖，遏制肿瘤形成，如miR-143、miR-145类似于抑癌基因的功能[13]，其失活亦可导致肿瘤的发生。let-7是最早被证实与肿瘤形成相关的miRNA。近期的研究表明，le