发酵工程——维生素C的生产工艺.pptVIP

一、维生素C ( Vitamin C VC) 维生素C又名抗坏血酸(Ascorbic acid)，呈白色粉末，无臭，味酸，熔点190～192℃，易溶于水和甲醇，略溶于乙醇，不溶于乙醚、氯仿及石油醚等。具有较强的还原性，易受光、热、氧等破坏，在碱液中或有微量金属离子存在时，分解更快，但干燥结晶后较稳定。VC是一种人体必需的水溶性维生素，也是一种抗氧化剂，广泛应用于医药、食品、饲料等领域。 2、微生物发酵合成法 D-山梨醇途径 L-山梨糖途径 L-艾杜糖酸途径 2-酮-D-葡糖糖酸途径 2,5-二酮-D-葡糖糖酸途径 2-酮-L-古龙酸途径 三、二步发酵法生产工艺 （一）二步发酵法生产维生素C的工艺流程 （二）、具体步骤 四、菌种的制备及种子的扩大培养 （1）、第一步发酵 1、菌种：一步发酵中所用菌种为生黑葡萄糖酸杆菌(Gluconobacter melagenus)，简称黑醋菌。最常用的生产菌株为R—30，其主要特征是：细胞椭圆至短杆状，革兰氏染色阳性，无芽孢大小为(0.5一0.8)um x(1.0-2.2)um。端生草根鞭毛运动，菌落边缘整介，微显浅褐色。生长最适温度为34℃±l℃，氧化D-山梨醇的发酵收率可达98％以上。 2、一级种子扩大培养：种子培养基成分为：山梨醇20％，酵母膏0.7％，碳酸钙0.15%，无机盐溶液0.4％。其中，无机盐溶液的组成为：MgSO4·7H2O1.25g／100 mL， (NH4)H2PO47．5g／100mL，KH2PO45g／100mI,K2SO41.25g／100ml.PH6.7,121℃,30min灭菌。 3、第一步发酵培养：发酵液培养基成分为：酵母膏0.035％，碳酸钙0.1％，玉米浆0.1％，复合维生素B 0.001％，山梨醇浓度视需要而定，该氧化反应的耗氧量较大，所以通气比要求1:1VVM以上。即使在通气量较大，且搅拌转速较高的条件下，发酵至4h后溶解氧浓度急剧下降，甚至接近于零。直到10h左右才逐渐回升。当溶解氧浓度回复至最高点，成水平直线时，表示该反应已达终点。D-山梨醇转化为L-山梨糖的生物转化率达98%以上。发酵液经低温60℃灭菌20min,冷却至30℃，作为第二步发酵的原料。。 五、发酵工艺中的部分设备 * 维生素C 的工艺原理 胡蕾 11010010108 获得维生素的方法 提取法：从富含维生素的天然食物和药用 植物中浓缩、 提取。目前只有极少数维生素采用提取法，例如维生素A、E。 生物合成法：微生物发酵法和微藻类的生物转化法，目前发展很快。 化学合成法：目前生产维生素的主要方法。 维c合成方法 莱氏化学合成法 微生物发酵合成法 二、目前合成方法 1、莱氏法 1933年瑞士化学家莱齐特因等用化学合成方法合成维生素C，也称莱氏法。该法主要以D-山梨醇作为原料，是最早生产维生素C的方法，也是国外采用的方法。工艺路线主要如下： D-山梨醇 L-山梨糖 黑菌醋的发酵氧化 二丙酮-L-山梨糖 丙酮 发酵硫酸 双丙酮-2-酮基 -L-古龙酸钠 次氯酸纳 氧化 双丙酮-2-酮基- L-古龙酸 酸化 维生素C HCl 化学转化 优点：该法生产的维生素C产品质量好、收率高，达60％，而且生产原料易获得，中间产物化学性质稳定，一直是国外生产维生素C的重要方法 缺点：生产工序繁多、劳动强度大、大量有机溶剂的使用易造成环境污染等 莱氏法的优缺点 六条不同的途径最终都是以2-酮-L-古龙酸为最终产物，在经过化学转化合成维生素C。其中只有第二条实现了工业化生产，此即为我国自行开发的二步发酵法。二步发酵工艺是中国科学院微生物研究所和北京制药厂于1975年合作发明的，此法进一步发展了维生素C的生产，是目前唯一成功应用于维生素C工业生产的微生物转化法。 制备工艺简单，生产周期短和三废污染少等。 有什么优点呢 1985年转让给世界上生产维生素最大的企业——瑞士霍夫曼·罗氏制药公司。 主要分为发酵、提取、转化、精制四个过程。总的工艺路线： 第一步： D-葡萄糖 D-山梨醇 H2 催化 L-山梨糖 黑醋酸菌 第二步： L-山梨糖 2-酮基-L-古龙酸 （2KGA) 小菌氧化葡萄糖酸杆菌和大菌巨大芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌等伴生菌混合发酵 维生素C 内脂化 烯醇化 1、发酵：在氢气、黑醋酸菌的作用下通过一步和二步发酵得到古龙酸钠 发酵液。 发酵液 2、提取: 上清液 离子交换 加热凝聚 离心过滤 滤液 二次离子交换 浓缩 结晶 干燥 古龙酸去转化 3、转化： 甲酯化、类酯化 离心分离 维c钠 酸化脱色 离心分离 浓缩 结晶 离心分离 粗维c 粗维c 溶解脱色 活性炭、热的去离子水 过滤 结晶 离心过滤 母液回收 真空干燥