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- 2019-07-16 发布于江苏
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* 考点1 微生物的分离和培养 专题八 生物技术实践 1.理清培养基制备与微生物纯化技术 要点整合 (1)为了确定培养基的灭菌是否合格,微生物学实验一般会设置空白对照:随机取若干灭菌后的空白平板培养基在适宜条件下培养一段时间,观察培养基上是否有菌落生成。 (2)观察菌落需用固体培养基,因此培养基要添加琼脂。 (3)倒平板的温度一般在50 ℃左右,温度过高会烫手,温度过低培养基会凝固。 (4)平板需倒置,这样既可使培养基表面的水分更好地挥发,又能防止皿盖上的水珠落入培养基,造成培养基污染。 (5)平板划线法只适用于微生物的提纯,不适合进行计数,并且在最后一次划线的末端处的菌种最纯。 (6)利用稀释涂布平板法估算水样中的活菌数的计算公式:(C÷V)×M(稀释倍数)。 (7)菌种可用甘油管藏法长期保存,保存时菌液中常添加一定量的甘油。 2.微生物分离与计数的两个实例 (1)土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 ①筛选菌株:利用以尿素为唯一氮源的选择培养基筛选菌株。 ②测定微生物数量的常用方法:活菌计数法和显微镜直接计数法。 ③过程:土壤取样→样品稀释→微生物的培养与观察。 ④鉴定方法:含酚红指示剂的以尿素为唯一氮源的培养基→细菌→指示剂变红,则该菌能分解尿素。 (2)分解纤维素的微生物的分离 ①实验原理: 即通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 ②流程:土壤取样→选择培养→梯度稀释→涂布
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