脂质代谢紊乱及其相关疾病.ppt

思考题 简述平滑肌细胞在动脉粥样硬化发生发展过程中的作用。 脂肪肝 在高脂的细胞模型上看目的因子对细胞中TG含量的变化及代谢通路上相关因子的改变。高脂模型可以是脂肪酸作用引起的脂滴生成（如油酸0.5-1mM刺激下脂滴生成），也可以是高糖作用的下的脂滴增多。 观察下列因子的改变，包括脂肪酸合成相关基因，如FAS、SCD1、ACC等，脂肪酸β-氧化相关因子，如PGC1a、PPARa和CPT1等，分泌和转运相关蛋白，如：apoB、FABP、FATP等，以及脂肪分解的因子：ATGL、HSL等。 如果在细胞水平证实该目的因子对脂代谢有作用，进而就可以在动物的脂肪肝模型上进行实验，如果是DIO mice的话，因为形成脂肪肝的周期长，可能腺病毒需要打不止一次，一般每隔两周一次，直到对照组出现脂肪肝。先明确病毒的作用如何，再从油红染色、HE染色以及TG含量检测确定目的因子是否在动物体内有效，进而看是对脂代谢上的哪个通路有影响，再深入研究它的作用机制。 胰岛素敏感性 细胞水平 转染目的因子后24-72h换加胰岛素（0.6ug/ml）的培基刺激20min，收细胞检测胰岛素敏感性 （IR IRS AKT的磷酸化是否改变） 动物水平 如果细胞水平证实有作用就可以动物注射，检测GTT、ITT是否有改变，以及麻醉小鼠后下腔静脉或门静脉注射insulin3min后，收集肝组织观察胰岛素敏感性 机制研究 如果上两步均成立，深入研究就是找到目的因子是通过什么中间环节发挥作用，进而上下调该中间因子看目的因子的作用是否被阻断，这一步同样也分细胞和动物两个水平。 * 根据脂蛋白组成和特性分成：（1）乳糜微粒（CM）：含甘油三酯高，但不易引起病变。（2）极低密度脂蛋白胆固醇（VLDL-C）：甘油三酯含量较高，易脱出沉积于血管产生病变，较常见。（3）低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）：颗粒较小，胆固醇含量高，易进入损伤动脉壁，且胆固醇易脱出沉积于血管壁产生病变，有“至动脉粥样硬化脂蛋白之称。（4）高密度脂蛋白胆固醇(HDL)：颗粒最小，蛋白含量高，能自由进出动脉壁且稳定，对动脉有两项作用，一是保护作用，即防止胆固醇固定在动脉细胞内，二是清理作用，即溶解已经储存在血管内的胆固醇，并带至肝脏代谢 * * 这是低密度脂蛋白（LDL）。 LDL表层的多不饱和脂肪酸很容易被血浆中存在氧离子（ O2- ）和过氧化离子（ O2- ）氧化，发生双链断裂，并与LDL表层的载脂蛋白B（ ApoB ）交联形成一种叫共轭双烯的物质，由于共轭双烯的存在使得LDL表层结构发生了变化，形成了氧化修饰的LDL，即ox-LDL，而这种修饰的直接结果就是导致ox-LDL对巨噬细胞表面的清道夫受体AI（ SR-A ）产生了极强的亲和力。 * oxLDL的致AS特性 上调单核细胞/巨噬细胞清道夫受体，能被巨噬细胞迅速摄取，且无负反馈调节；上调其内皮细胞受体LOX-1表达，通过刺激内皮细胞释放MCP-1间接吸引单核细胞；刺激EC释放单克隆刺激因子促进单核细胞分化成组织巨噬细胞；抑制局部巨噬细胞迁移；是T细胞但非B细胞趋化因子。因此粥样斑块中包含单核细胞和T细胞。oxLDL具有免疫原性，并对多种细胞包括EC具有细胞毒作用，使内膜完整性受损。刺激单核细胞/巨噬细胞表达IL-1b，抑制内皮细胞的血管舒张；刺激SMC及成终结细胞分泌MMP，激活MMP影响斑块稳定性。， * * * * 易损斑块的形成 ①相对大的体积 ②外向性（正性）重构 ③大的脂核（≥斑块体积的40%） ④多的炎症细胞浸润（主要是单核、巨噬细胞） ⑤薄的纤维帽（平滑肌和胶原纤维少） ⑥新生血管增加 动脉粥样硬化的病理生理 血管内皮功能障碍与动脉粥样硬化 氧化应激与动脉粥样硬化 脂肪酸与动脉粥样硬化 孤儿核受体与动脉粥样硬化 类胰蛋白酶与动脉粥样硬化 A Healthy Endothelium produces: á PGI2 á NO Maintaining an anti-coagulant, anti-thrombotic surface A Dysfunctional Endothelium has decreased: a PGI2 a NO Shifting to a pro-coagulant, pro-thrombotic surface Increased: pro-inflammatory molecules: MCP-1 TNFa VCAM-1 血管内皮功能障碍与动脉粥样硬化 内皮细胞合成的因子 参与过程 效应 PDGF TGF-b 肝素样糖胺聚糖（Heparin-like GAG） NO Endothelin Angiotension II