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班级: 姓名: 学号:
学习目标
1、尝试学会提取DNA的方法及鉴定DNA的方法
2、注意提取DNA过程中2次加水的作用
课 前 预 习
备注
一、 认真阅读p56-57的“提取DNA”的正文,讨论此实验中的实验原理:
(1)DNA的 随NaCl的浓度变化而 ,DNA在 NaCl溶液中的溶解度最低。通过改变NaCl溶液的浓度,溶解在NaCl溶液中的DNA会析出来。
(2)DNA不溶于 溶液,部分 可以溶于酒精溶液,据此可将DNA进一步提纯。
(3)DNA遇到 ,沸水浴下呈 。
二、实验步骤
500ml烧杯→
500ml烧杯→玻璃棒充分搅拌→将混合均匀的活鸡血置于4℃
0.1g
0.1g/ml柠檬酸钠100ml
活鸡血180ml
2.方法步骤 取鸡血细胞液5~10ml+20ml 于50 ml
(1)提取血细胞核物质 搅拌5 min,用纱布过滤,取 ,滤液中
含 和其他核物质,如蛋白质
(2)溶解核内DNA:取滤液+ NaCl溶液40ml,玻璃棒沿 搅拌
(3)析出含DNA的粘稠物:向上述溶液中缓缓加入 ,并用玻璃棒轻轻地沿 方向搅拌,发现有 出现,当丝状物不再增加时,停止 (此时NaCl溶液相当于稀释到 )
(4)滤取含DNA的粘稠物:用多层纱布过滤,含 的粘稠物留在纱布上
(5)DNA粘稠物再溶解: 20ml2mol/LNaCl溶液 放在50ml烧杯中
+ 上述粘稠物 缓慢搅拌3 min
(6)过滤含DNA的2mol/LNaCl溶液:用2层纱布过滤, 中含DNA
(7)提取含杂质较少的DNA:上述溶液+ ,缓慢搅拌, 出现
色丝状物,用玻璃棒将丝装物卷起。
(8)DNA鉴定:DNA遇到 沸水浴加热变 ,因此,可用
作为DNA的鉴定试剂
课 堂 研 讨
备注
1、用来提取DNA的动物血液,为何选用鸡血而不用猪、羊等哺乳动物的血液?
2、在制备鸡血细胞溶液过程中,要加入柠檬酸钠溶液有何作用?
联系生活想一想:此有何应用?
3、 第一次提取过滤时,为何要取其滤液?
4、 实验过程中加了蒸馏水几次?各有什么作用?当向滤液中加入蒸馏水到一定量时,为何有丝状物出现,这丝状物是什么?
5、每次用玻璃棒搅拌时,有何要求?为什么?
6、讨论:试画出DNA溶解度随着NaCl溶液的浓度变化的曲线图。
7、现在由于禽流感缘故,鸡血很难采集,能否用植物细胞作为提取DNA实验材料,若能,又如何操作?
学 后 反 思
课题:4.1探索遗传物质的过程(2)
班级: 姓名: 学号:
课 堂 检 测
备注
1、对提取DNA过程中三次过滤的叙述中,不正确的是
A .第一次过滤后,核物质存在于滤出的固体物中
B.第二次过滤后,使用多层纱布,DNA存在于纱布上的黏稠物中
C.第三次过滤后,DNA存在于滤液中,可进一步除去非DNA 物质
D.上述BC均正确
2、下列操作中,对DNA的提取量影响较小的是
A.使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂,放出DNA等核物质
B.搅拌时,要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动
C.在“析出DNA黏稠物”时,要缓缓加蒸馏水,直至溶液中的黏稠物不再
增多
D.在用酒精沉淀DNA时,要使用冷酒精,甚至再将混合液放入冰箱中冷却
3、.对析出DNA黏稠物有关的叙述,不正确的是
A.操作时缓缓滴加蒸馏水,降低DNA的溶解度
B.在操作A时,用玻璃棒轻缓搅拌,以保证DNA分子完整
C.加蒸馏水可同时降低DNA和蛋白质的溶解度,两者均可析出
D. 当丝状黏稠物不再增加时,此时氯化钠的浓度相当于O.14 mol/L
4、在提取DNA过程中, 玻璃棒要轻缓沿一个方向搅拌,目的是
A. 为了省劲 B. 加快的DNA析出
C. 加大DNA的溶解度 D. 防止DNA结构被破坏,析出较多的DNA
5、在提取DNA过程中,加入酒精的目的是
A.溶解, DNA
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