高中生物选修三：2.2 动物细胞工程2.pptVIP

2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 一、动物细胞融合 动物细胞融合也称为细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合成一个细胞的过程。 1.动物细胞融合过程 灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面 细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接 细胞融合，形成杂种细胞 （细胞膜具有一定的流动性） 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 细胞融合原理 细胞膜的流动性、 细胞膜的流动性 细胞融合的方法 去除细胞壁后诱导原生质体融合 使细胞分散后诱导细胞融合 诱导方法 物理（离心、振荡、电刺激） 化学（聚乙二醇） 物理、化学方法（同左） 灭活的病毒 用途 获得杂种植株 制备单克隆抗体 2.植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 3.细胞融合技术的优势 突破了有性杂交方面的局限，使远缘杂交成为可能。 4.细胞融合技术的应用 细胞遗传、细胞免疫肿瘤和生物新品种培育等。特别是制备单克隆抗体。 二、单克隆抗体 抗体:机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 浆细胞（效应B淋巴细胞）产生抗体。 单克隆抗体:由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 特点：特异性强、灵敏度高。 所以传统的抗体的生产方法的缺陷是什么？ 怎样解决这个问题？ 1.B淋巴细胞与抗体的关系： (1) B淋巴细胞受抗原刺激后，可以产生抗体。 (2) 动物体内的B淋巴细胞可以产生百万种以上的抗体，每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。 (3) 每一个B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体。但一个B淋巴细胞不能在体外培养条件下无限增殖。 传统的抗体的生产方法：向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体，然后，从动物血清中分离出所需抗体。产量低、纯度低、特异性差。 淋巴细胞能产生抗体；肿瘤细胞能无限增殖。利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得具有淋巴细胞和肿瘤细胞特性的杂交瘤细胞。即具有B淋巴细胞的特性只分泌一种特异性抗体，又具有肿瘤细胞的特性能无限增殖。利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞。 2.如何大量生产单克隆抗体 B淋巴细胞 注射抗原 培养 骨髓瘤细胞 细胞融合 单克隆抗体的制备过程 多种杂交细胞 在具有筛选作用 的培养基上培养 专一抗性 检验阳性 克隆上述 杂交细胞 专一抗性 检验阳性 将不同杂种 细胞分开，并 克隆专一抗体，检验阳性细胞 体外培养 注射到小鼠体内 单克隆抗体 3. 两次筛选： 筛选杂交瘤细胞；筛选能分泌特异性抗体的杂技瘤细胞。 （1）作为诊断试剂：体外诊断试剂；纯度高、特异性强；准确、高效、简易、快速。 单克隆抗体 药物 4.单克隆抗体的应用 （2）用于治疗疾病和运载药物：主要用于癌症治疗；制成“生物导弹”。 定向寻找目标 杀灭目标 1.植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术有什么不同？ 植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术基本相同，不同的是植物体细胞融合前需去掉细胞壁，然后再融合；动物细胞融合是两个体细胞直接融合。 2.制备单克隆抗体时，为什么要选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞？ 哺乳动物感染抗原后，其体内会形成相应的B淋巴细胞，B淋巴细胞能分泌相应的抗体凝聚或杀死这些抗原。动物在免疫反应的过程中，每一种B淋巴细胞能分泌一种特异性抗体，要想获得大量的特异性抗体，必须使能分泌该单一抗体的B淋巴细胞大量增殖。B淋巴细胞具有产生单一抗体的能力，但不能在体外增殖；骨髓瘤细胞是一种癌细胞，它能在体外培养条件下无限增殖，但不能产生抗体。因此，把一种B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合，产生杂交瘤细胞，它会兼有两个亲本细胞的特性──在体外培养条件下能不断增殖，同时能产生出某种特异性的抗体。