无菌动物-吉林大学动物中心.ppt

第三节 悉生动物和无菌动物在比较医学研究中的应用 (一)无菌动物 无菌动物是指不能检出一切生命体的动物，用现有的检测技术在动物体内外的任何部位均检不出任何活的微生物和寄生虫的动物。 此微生物指病毒、立克次体、细菌(包括螺旋体、支原体)、真菌和原虫。 这里的无菌是一个相对概念，不过是根据现有的科学知识和检测方法在一定时期内不能检出病原体而已。 随着科学技术的发展，现在认为是无菌的动物或许将来可以检出病原体而不是无菌动物。 因此，这个无菌是相对而言的。 用大量抗菌素也可以使普通动物暂时无菌，这种动物是不是无菌动物? 因为这种无菌状态往往是一时性的，某些残留的细胞在适当的条件下又会在体内增殖，即使把体内细菌全部杀死，它们给动物造成的影响却是无法消除的。 如特异性抗体的存在、网状内皮系统的活化、某些组织或器官的病理变化等。因此无菌动物必须是生来就是无菌的动物。 无菌动物并不等于普通实验动物除去了微生物。人工培育的无菌动物适应了无菌生活，所以在形态、生理、代谢及机体防御等方面都具有一定的特点。 特点 无菌动物和普通动物外观和活动之间看不出有特别的差异，有时仅见有体重增加，但是其机能、结构和普通动物有很大的不同。 无菌动物主要有以下两方面的特点： 1．形态学改变 (1)消化系统 主要变化在肠道上。无菌动物肠道肌层薄，更为特异的是盲肠肥大，比普通动物大5~6倍，无菌豚鼠的盲肠可达体重的1/3，主要是由于肠壁薄，张力低而增大，这也导致盲肠扭转或肠壁破裂而死亡。 如给无菌动物注入梭状芽孢杆菌则可缩小盲肠体积。无菌动物的肠黏膜绒毛增多，肝脏重量相对下降，导致解毒功能有所下降。 (2)血液循环系统 心脏相对缩小，白细胞增加，普通动物白细胞总数波动范围大，无菌动物白细胞数值恒定。 (3)免疫系统 胸腺中网状上皮细胞体积较大，其胞浆内泡状结构和溶酶体少。无菌兔胸腺中以小淋巴细胞为主，其中的张力微丝含量较普通动物明显减少，胸腺和淋巴结处于功能较不活跃状态，脾脏缩小，无二级滤泡，网状内皮细胞功能下降。由于无菌动物几乎没有受过抗原刺激，其免疫机能基本上处于原始状态。 (4)泌尿系统 肾脏较小，如无菌豚鼠。 2．生理学改变 (1)免疫功能 因为体内无微生物和寄生虫，血中无抗体，血清杀菌力低，吞噬细胞噬菌力也低，因此对微生物感染异常敏感。某些病原性弱和必须经腹腔或颅脑接种才能感染普通动物的微生物很容易感染无菌动物。 (2)生长率 无菌条件下对不同种属影响不同。无菌鸟类生长率高于同种普通鸟，无菌大小鼠与普通鼠差不多，无菌豚鼠和无菌兔生长率比普通者慢。 因肠内无菌，不能帮助消化纤维素以提供机体所需的营养。 (3)生殖 无菌条件对动物的生殖影响不大。大小鼠因出生无感染身体较好，无菌豚鼠及兔比普通者繁殖力低。 (4)代谢 血中含氮量少，肠管对水的吸收率低，代谢周期比普通动物长。 (5)营养 与动物品种有关，鼠和兔的肠道长，故有影响。无菌动物肠道上皮细胞更新率比一般动物低，肠壁的物质交换也较慢。 应用 由于在这种动物的机体中排除了各种微生物的干扰，就可对其他科研问题的实验得出较明确的结果。另外，如将单一已知微生物接种到无菌动物体内，就可以研究机体和单一纯微生物的相互关系。 无菌动物在生物医学研究中因具有独特作用，因此多年来在医学科学研究的很多方面已被广泛应用。 1．在微生物和寄生虫学研究中的应用 (1)研究某些疾病的病原 如猫瘟病毒，正常猫易感染，无菌猫则不易受感染，说明感染受肠道微生物的影响。 (2)研究细菌学 尤其是肠道正常菌丛细胞间的相互拮抗性及细胞和宿主间的关系的研究。 霍乱弧菌：口服霍乱弧菌使无菌幼豚鼠单菌感染时，就可使其死亡，但当使该动物同时感染产气荚膜(梭状芽胞)杆菌时，就可以除去霍乱弧菌，动物可以不发生死亡。 2．在免疫学研究中的应用 无菌动物在免疫学研究中的应用，乃是促进发展无菌动物模型的动机之一。无菌动物血中无特异性抗体，很适合于各种免疫现象的研究。 由于在无菌动物机体内除去了生活的微生物，使无菌动物大大增强了对感染的感受性。如将无菌鼠从无菌系统中移到普通动物饲养区，常在几天内死亡，病因常是梭状芽孢杆菌感染。 3．在放射医学研究中的应用 用无菌动物研究放射的生物学效应，就可以将由放射所引起的症状和因感染而发生的症状分别开来。 无菌动物能耐受较大剂量的X线照射，用致死剂量照射后动物的存活时间也要长些。 因放射而引起的黏膜损伤，无菌动物比普通对照动物要轻。 大剂量射线照射普通动物，除照射本身的影响外，尚有肠道微生物影响。 而照射对无菌动物则主要为照射本身引起的后果。 4．在营养、代谢研究中的应用 (1)无菌动物是研究营养的好模型 很多营养成分是靠细菌降解的。正常动物的肠道可合成维生素B、K。应用无