玉米中呕吐毒素的表面等离子谐振生物传感器检测技术研究.pdfVIP

2018年第4期 中国饲料 一65一 DOI：10．15906／j．cnki．cnll一2975／s 玉米中呕吐毒素的表面等离子谐振生物传感器 检测技术研究 周历岚1’2，米佳飞1，王战辉1+ (1．中国农业大学动物医学院，北京100193；2．中粮肉食投资有限公司，北京100020) plasmon buffer OVA在磷酸盐(Phosphatesaline，PBS)缓冲液中进行羧基修饰、活化，优化抗体工作浓度为10“g／kg，确定 最适反应时间为30 系数小于15％。经实际样本测试，SPR检测方法与高效液相色谱方法的相关性良好，R2均大于o．95。基于上述研究表明， 本研究建立的玉米中DON的SPR检测方法能满足玉米中DON毒素的检测需求。 【关键词】呕吐毒素；表面等离子谐振；玉米；检测方法 【中图分类号】R155．5 【文献标识码】A 料中DON残留量十分必要。目前，真菌毒素检测 呕吐毒素(Deoxynivalenol，DON)又称脱氧 雪腐镰刀菌烯醇，是由E镰刀菌属、木霉菌、禾 方法很多，但都不同程度地存在样品前处理复杂、 谷镰刀菌等多种真菌产生的次级代谢产物，属单 操作时间长等缺点，因此，探索快速准确的真菌毒 端孢霉烯族化合物。1973年DON结构被阐明素检测方法是当前的研究热点。基于表面等离子 o其化 谐振(Surface (Scarpino等，2015；Yoshizawa等，1973 plasmon 学名称为3ot，7仅，15一三羟基一12，13一环氧单 的传感器利用生物薄膜技术，把具有特异性生物 端孢霉一9一烯一8一酮，是四环的倍半萜(Krska等，表面基质的目标物印刷在金属膜表面，并且利用 2001)。DON在甲醇溶剂中不稳定，室温放置22生物偶联等方法在基质层上进行修饰特定蛋白， d后其TLC发生明显变化，乙腈和乙酸乙酯可做实现对溶液中目标物的检测。该技术具有操作简 为DON的长期保存溶剂(Wei等，1986oDON单、耗样量少、检测时间短、无需标记、灵敏度高， 热稳定性强，对碱性较敏感，经加碱、高压、热蒸汽 能实时监测反应动态过程，无需纯化各种生物组 的处理后可除掉部分毒素(Cenkowski等，2006)，分，只需对样品进行简单处理的优点，已被应用于 延长时间可以去掉全部毒素。不同种类动物对 化学性危害物的检测领域。然而针对真菌毒素的 DON的敏感性不同，猪对DON最敏感，在摄入SPR检测方法报道较少，因此，本研究利用SPR DON后会引起拒食。禽类、反刍动物对技术制备了传感器芯片，建立DON的SPR检测 lmg／kg 方法，为快速高通量检测玉米中DON残留提供了 DON非常不敏感(Philippe等，2008)。Sypecka 新的思路。 等(2004)发现，DON对鸡蛋不造成影响，即使饲 料中DON含量高达10 1材料与方法 mg／kg，蛋中DON含量依 然很低，产蛋量也并未受到影响。 1．1 仪器与试剂 表面等离子谐振仪Interbio DON是饲料中对畜禽危害最大的真菌毒素$400(北京华安麦科生物技术有限公司)； 之一，可引起畜禽真菌毒素中毒症。因此，检测饲 万方数据 一66一 中国饲料 2018年第4期 (美国T