分子生物学II新教案百晶电泳系统版.docVIP

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分子生物学实验蛋白质的表达纯化及检测实验一外源基因在大肠杆菌中的诱导表达实验目的通过本实验了解外源基因在原核细胞中诱导表达情况实验原理将外源基因克隆在使用含有操作子的启动子的表达载体中让其在中表达首先在不加诱导剂的条件下培养宿主菌基因表达的产生的阻遏蛋白与操作子结合从而不能进行外源基因的表达然后向培养基中加入诱导物此时阻遏蛋白变构失活不能与操作子结合外源基因表达实验仪器材料与试剂实验仪器超净工作台试管摇床离心机等菌株和质粒菌株大肠杆菌重组质粒基因与重组主要试剂卡那霉素配用滤膜过滤除菌分成份贮存于

分子生物学实验II (蛋白质的表达、纯化及检测) 实验一:外源基因在大肠杆菌中的诱导表达 【实验目的】 通过本实验了解外源基因在原核细胞中诱导表达情况。 【实验原理】 将外源基因克隆在使用含有lac操作子的启动子的表达载体中,让其在E. coli中表达。首先在不加诱导剂的条件下培养宿主菌,lacI基因表达的产生的阻遏蛋白LacI与lac操作子结合,从而不能进行外源基因的表达;然后向培养基中加入诱导物IPTG,此时LacI阻遏蛋白变构失活,不能与lac操作子结合,外源基因表达。 【实验仪器、材料与试剂】 实验仪器:超净工作台、试管、摇床、离心机等。 菌株和质粒:菌株:大肠杆菌BL21;重

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