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- 2019-07-20 发布于江苏
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第十七章 生物技术在其他方面的应用;考点44 DNA、血红蛋白的提取;应试基础必备;(1)DNA提取实验操作分析
① 4次过滤的比较;②2次加蒸馏水的作用
a.加入鸡血细胞液中,使血细胞吸水涨破;
b.加入含DNA的2mol/L NaCl溶液中,使其稀释,从而析出DNA。
③3次使用纱布的作用
a.过滤血细胞破裂液,提取细胞核物质(DNA在滤液中);
b.过滤0.14mol/L NaCl溶液,滤出DNA(DNA在黏稠物中);
c.过滤溶有DNA的2mol/L NaCl溶液(DNA在滤液中)。
④3次使用 NaCl溶液的作用
a.2mol/L NaCl溶液,溶解DNA,去除不溶于该溶液的杂质;
b.0.14mol/L NaCl溶液,使DNA析出;
c.2mol/L NaCl溶液,溶解滤出的DNA黏稠物。;(1)常用的蛋白质分离方法
①凝胶色谱法(根据香港对分子质量大小分离蛋白质);②电泳法(带电粒子在电场作用下发生迁移)
a.在一定pH下,一些生物大分子(如多肽、核酸等)可解离的基团会带上正电或负电,在电场的作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。
b.由于分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状不同,使带电分子产生不同的迁移速率,从而实现样品中各种分子的分离。判断纯化的蛋白质是否达到要求使用最多的是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法。 ;(2)蛋白质
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