低温季节不同种群拟穴青蟹.doc

收稿日期：2017-10-09 录用日期：2017-12-19 基金项目：国家自然科学基金 *通信作者：gzwang@xmu.edu.cn doi:10.6043/j.issn.0438-0479.201710004 低温季节不同种群拟穴青蟹（Scylla paramamosain） 线粒体呼吸率和酶活性的差异 刘子明，王桂忠*，李少菁，陈志刚 （厦门大学 海洋与地球学院，近海海洋环境科学国家重点实验室，福建 厦门 361102） 摘要：近期已有研究显示分布于我国东南沿海的拟穴青蟹（Scylla paramamosain）可能已分化为南、北两个种群。在低温季节从不同纬度的三个海域采集拟穴青蟹的野生个体来比较其南、北种群线粒体呼吸率和酶活性的差异。结果如下：除了乳酸脱氢酶和丙酮酸激酶外，无论是北方种群还是南方种群，生活在纬度较高的宁波海域的拟穴青蟹其线粒体呼吸率和酶活性都显著高于生活在纬度较低的儋州海域的个体；同一海域南、北种群间的比较结果显示，鳃、肌肉和肝胰腺线粒体呼吸率和细胞色素C氧化酶活性总体上都是北方种群高于南方种群，纬度越高的海域其南、北种群间的差异越显著；南、北种群肌肉的乳酸脱氢酶、丙酮酸激酶和己糖激酶活性比较结果显示，宁波海域北方种群的己糖激酶活性显著高于该海域的南方种群。上述结果表明，分布于我国东南沿海的拟穴青蟹其北方种群比南方种群对温度有更有效的代谢补偿能力，且纬度越高，二者的差异越显著，由此可见分布于我国东南沿海的拟穴青蟹其北方种群比南方种群更能适应低温环境。 关键词：拟穴青蟹；种群；线粒体呼吸率；酶活性；纬度差异 中图分类号： P735 文献标志码：A 青蟹隶属于甲壳纲（Crustacea）十足目（Decapoda）梭子蟹科（Portunidae）青蟹属（Scylla），一般认为青蟹属有四个种，主要分布于暖温带和热带海域。形态学、12S rRNA、16S rRNA和COI基因序列分析结果表明，我国沿海的青蟹其优势种为拟穴青蟹（Scylla paramamosain）主要分布于我国长江口以南的东南沿岸水域，是一种重要的经济蟹类[1-8]。我国拟穴青蟹养殖规模较大，相关的研究也较多[9]，但其种群生物学的研究较少[10]。本课题组曾从形态学、生理学和遗传学等方面对拟穴青蟹种群生物学进行了一些研究，结果表明：分布于我国沿海的拟穴青蟹可能已分化为南、北两个种群，且南、北种群的个体混杂分布于我国不同海域，随纬度变化同一海域不同种群所占的比例不同。北方种群的个体主要分布于纬度较高的江浙沿岸海域，纬度越低其数量越少；南方种群的个体则主要分布于纬度较低的海南岛和北部湾沿岸海域，纬度越高其个体数量越少。两个种群适应环境温度的能力不同，北方种群比南方种群更能适应低温环境，在高温环境下则是南方种群生长得更好[10-12]。 最近，本课题组分析了分布在我国不同海域的拟穴青蟹其线粒体呼吸率和代谢酶活性的季节变化，发现分布在我国北方海域的拟穴青蟹其线粒体呼吸率和细胞色素C氧化酶（CCO）活性明显高于分布在我国南方海域的个体，说明分布于我国北方海域的拟穴青蟹比分布在我国南方海域的拟穴青蟹更能适应低温环境[12]，这个结果进一步支持了分布在我国沿海的拟穴青蟹可能已分化为南、北两个不同的种群的观点。前已述及，拟穴青蟹南、北种群的个体是混杂分布于我国不同海域，随纬度变化同一海域不同种群所占的比例不同。为了进一步查明分布在我国不同海域的北方种群是不是也比分布在我国不同海域的南方种群更能适应低温环境，本研究在我国东南沿海不同纬度的海域采集低温季节的拟穴青蟹野生样品来比较其南、北种群的线粒体呼吸率和CCO、乳酸脱氢酶（LDH）、丙酮酸激酶（PK）、己糖激酶（HK）活性的差异，采样的海域分别为浙江省的宁波、福建省的漳州和海南省的儋州，期望通过分析比较能进一步了解分布于我国沿海的拟穴青蟹其种群的分化情况、不同种群的分布规律及其生理特征，为我国拟穴青蟹种质资源的开发和保护以及水产养殖的生产和管理提供理论依据。 1 材料与方法 1.1 拟穴青蟹样品采集与处理 在我国热带、亚热带海域采集低温季节的野生拟穴青蟹，采样的海域分别为浙江省的宁波（纬度约为29°14）、福建省的漳州（23°79）和海南省的儋州（19°69），采样时间分别为2010年11月、2010年12月和2011年1月。采集到的拟穴青蟹活体运回实验室，按照本课题组确立的鉴定方法[12]进行分类鉴定以筛选出南、北种群的典型个体。拟穴青蟹南方种群的个体其螯足腕节外缘有2根刺，其中1根刺极小；北方种群的个体其螯足腕节外缘只有1根发达的刺。选取处于同一发育阶段、肢体完整健康的个体暂养在实验室中2天以让应试动物恢复到正常的生理状态。每个采样点的每个种群选取6只个体用于