茶叶中提取咖啡因及其测定.docxVIP

从茶叶中提取咖啡因及其测定 A 茶叶中咖啡因的提取及其红外光谱的测定 实验目的 通过从茶叶中提取咖啡因学习固-液萃取的原理及方法。 掌握索氏提取器的原理及其作用。 掌握升华原理及操作。 了解傅立叶变换红外光谱仪的工作原理，学习AVATAR360FT-IR的使用方法。 掌握常用的固态物质红外制样方法—溴化钾压片法。 学习利用红外吸收光谱对有机化合物结构进行定性鉴定的方法。 实验原理 茶叶中含有多种黄嘌呤衍生物的生物碱，起主要成分为含量2%~4%的咖啡因（Caffeine,又名咖啡碱），并含有少量茶碱和可可豆碱，以及11%~12%的丹宁酸（又称鞣酸），还有约0.6%的色素、纤维素和蛋白质等。 咖啡因的化学名为1，3，7-三甲基-2，6-二氧嘌呤，其结构为： 纯咖啡因为白色针状结晶体，无臭，味苦，置于空气中有风化性。易溶于水、乙醇、氯仿、丙酮、微溶于石油醚，难溶于苯和乙醚，它是弱减性物质，水溶液对石蕊试纸呈中性反应。咖啡因在C时失去结晶水并开始升华，C升华显著，时很快升华。无水咖啡因的熔点为。 咖啡因具有刺激心脏，兴奋大脑神经和利尿等作用，因此可单独作为有关药物的配方。咖啡因可由人工合成法或提取法获得。本实验采用索式提取法从茶叶中提取咖啡因。利用咖啡因易溶于乙醇，易升华等特点，以95%乙醇作溶剂，通过索氏提取器（或回流）进行连续提取，然后浓缩、焙炒而得粗制咖啡因，再通过升华提取得到纯的咖啡因。 红外吸收光谱是有机化合物结构鉴定的重要方法之一，它主要能提供有机物中所含有官能团等信息。 测定红外光谱时，不同类型的样品须采用不同的制样方法。固态样品一般可采用压片法和糊状法制样。压片法是将样品与溴化钾粉末混合研磨细和匀后，压制成厚度约为1mm的透明薄片；糊状法是将样片研磨成足够细的粉末，然后用液体石蜡或四氯化碳调成糊状，然后将糊状物薄薄地均匀涂布在溴化钾晶片上。因为石蜡或四氯化碳本身在红外光谱中有吸收，所以在解析谱图时要将它们产生的吸收峰扣除。图4-32是液体石蜡和四氯化碳的红外吸收光谱图。 测绘样品的红外光谱图仅仅是化合物结构坚定工作的第一步，更重要的是对红外光谱图进行解析。红外光谱图中有很多吸收峰，含有丰富的结构信息，但其中有许多我们还不能准确地解释。对于初学者来说，主要应掌握4000~1500官能团特征频率区的吸收峰和1500以下一些重要吸收峰的回归，并学会红外标准谱图的查阅或标准谱库的计算机检索方法。 仪器与试剂 仪器：60mL索氏提取器一套、蒸发皿、玻璃漏斗、蒸馏头、接受管、50mL锥形瓶、直形冷凝管。AVATAR360FT-IR红外光谱仪或其他型号的红外谱仪器。红外干燥灯、不锈钢镊子和样品刮刀、玛瑙研钵、试样纸片、压模、压片机、磁性样品架、无水乙醇浸泡的脱脂棉等 试剂：茶叶、95%乙醇、生石灰、溴化钾粉末。 实验装置图 茶叶中咖啡因的提取装置图 蒸馏装置图 升华装置图 实验步骤 从茶叶中提取咖啡因 用熔点仪测咖啡因熔点 红外光谱吸收测定 开启仪器，启动计算机并进入OMNIC窗口。 压片法制样：取1~2mg干燥试样放入玛瑙研钵中，加入100mg左右的溴化钾粉末，磨细研匀。按照图4-33顺序放好压模的底座、底摸片、试样纸片和压模体，然后，将研磨好的含试样的溴化钾粉末小心放入试样纸片中央的孔中，将压杆插入压模体，在插到底后，轻轻转动使假如的溴化钾粉末铺匀。把整个压模放到压片机的工作台垫板上（见图4-34），旋转压力丝杆手轮压紧压模，顺时针旋转放油阀到底，然后，缓慢上下压动压把，观察压力表。当压力达到（约100~120）时，停止加压，维持2~3min，反时针旋转放油阀，压力解除，压力表指针回到“0”，旋松压力丝杆手轮，取出压模，即可得到固定在试样纸片孔中的透明晶片。将试样纸片小心放在磁性样品架的正中间，压力磁性片。制好的试样供下一步收集样品图时用。 绘制试样咖啡因的红外光谱图并进行标准谱库检索。整个过程包括（1）设定收集参数；（2）收集背景；（3）收集样品图；（4）对所得试样谱图进行基线校正，标峰等处理；（5）标准谱库检索；（6）打印谱图。 收集样品图完成后，即可从样品室中取出样品架。并用浸有无水乙醇的脱脂棉将用过的研钵、镊子、刮刀、压模等清洗干净，置于红外干燥灯下烘干，以备制下一个试样。 实验结果 得到咖啡因产品0.1025g。 测的咖啡因初熔：224.5℃；终熔：226.3℃。 3、根据试样谱图分析可知，1024.88cm：C=N;1702.14cm：C=O;1284.82cm:C-C。该试样为咖啡因。因为有杂质峰和溶剂峰影响以及实验条件的不同，试样谱图与标准谱图匹配相似为92.91%。 七、注意事项 1、加入生石灰起中和作用，以除去单宁酸等酸性的物质。生石灰一定要研细。 2、乙醇将要蒸干时，固体易溅出皿外，应注意防止着火。 3、