气相色谱法测定血清中丙戊酸钠浓度.pptVIP

气相色谱法测定血清中丙戊酸钠浓度 主讲人：毛琼琼 2019年3月30日 彭海洲 宋飞 丙戊酸钠 简介 分析背景 分析步骤 思考题 谢谢 观看 参考文献 丙戊酸钠 常用剂型 原发性大发作和 失神小发作的首选药 广谱抗癫痫药 片剂：200mg规格 糖浆剂：300ml规格 注射剂: 每瓶内含400mg近白色 的无菌丙戊酸钠冻干粉, 随附1支4ml注射用水 丙戊酸钠Sodium Valproate 别名 抗痫灵 丙戊酸钠 简介 分析背景 分析步骤 思考题 谢谢 观看 参考文献 分析背景 监测方法很多, 目前以免疫测定法 高效液相色谱法(HPLC) 等 缺点 找一种分析方法可以满足临床检测血丙戊酸钠浓度的要求 临床上使用的大多数 抗癫痫药物, 均需要进行治疗药物 监测( TDM) 抗癫痫药物丙戊酸 钠 操作程序复杂, 分析流程长, 费用昂贵, 不利于临床推广 应用。 药物分析人员 气相色谱法GC 测定血清中丙戊酸钠浓度 丙戊酸钠 简介 分析背景 分析步骤 思考题 谢谢 观看 参考文献 仪器与试剂 样品处理 色谱条件 GC对血清中丙戊酸钠浓度分析步骤 线性关系与检测限 精密度 回收率 讨论 GC-15A 气相色谱仪, 氢火焰检测器,C2R4A 色谱工作站(shimadzu 产品) 、 LXJ2 Ⅱ离 心沉淀机(上海医疗器械三厂) 仪器 样品 仪器与试剂 　丙戊酸钠提取液 　丙戊酸钠标准溶液 　 试剂 高纯氮气和高纯氢气。 硫酸、三氯甲烷(长沙试剂公司) , 丙戊酸钠(VPA) 、苯酚 (Phenol ,Sigma 公司产品) 。 GC-15A 气相色谱仪 氢火焰检测器 离心沉淀机 样品处理 色谱条件 　取3 ml 全血于5 ml 速凝管内,离心, 取上层血清0. 5 ml 于5 ml 的玻璃离心管内,加50μl 5 mol/ L 的H2SO4和0. 5 ml 提取液,加盖,振荡提取1 min ,3 000 r/ min 离心5 min。取1μl 氯仿液于气相色谱仪上进样(图1～ 图4) 。从图1 可知,6 min 保留时间(RT) 便可以完成血清丙 戊酸钠浓度的检测 　炉温170 ℃,氢火焰检测器 温度220 ℃, 进样器温度220 ℃, 氢气流速40 ml/ min , 氮气 流速35 ml/ min , 空气流速500 ml/ min 讨论 本研究中丙戊酸钠和内标苯酚的峰距较大, 不利于控制气相色谱仪工作时各参数的微小变动所产生的误差。 建立气相色谱法定量测定血清中抗癫痫药丙戊酸钠浓度的关键,在于寻找合适的内标准物质。 为注意将收集到的临床标本 置于4 ℃冰箱中保存,实验证明 此条件下,一周内对样品的 测定结果没有影响 在加入丙戊酸钠提取液, 离心时常常由于样品中蛋 白质含量过高,仍不能分离, 此时可用微量加样器沿壁搅动, 再离心,以达到分离的效果。 使用微量进样器时, 应该保持干燥, 否则会使测定的峰变宽, 延迟出峰时间 参考文献 [ 1 ] 　朱伊. 高效液相色谱法测定人血清中丙戊酸钠含量分析[J ] . 福 建医药杂志,2019 ,23 (4) :1272128. [ 2 ] 　陈坚,方维军,吴芳,等. 高效液相色谱法测定丙戊酸血药浓度 [J ] . 上海医院药学, 2000 ,11 (3) :33235. [ 3 ] 　程玲,罗雯红,李慧,等. 高效液相色谱法测定癫痫病人血清中 丙戊酸的浓度[J ] . 汕头大学医学院学报,2000 ,13 (3) :73274. [4 ] 　张敬军,俞丽云,瞿治平. 高效液相色谱法测定癫痫病人血清中 丙戊酸的浓度[J ] . 中华神经科杂志,2019 ,32 (1) :57258. [ 5 ] 　郁健, 王广基,杜春波. 高效液相色谱法测定癫痫病人血清中丙 戊酸的浓度[J ] . 中国药科大学学报, 2019 , 29 (1) :45246. [6 ] 　郑惠良,祁元明,杨莹. 高效液相色谱法测定癫痫病人血清中丙 戊酸的浓度[J ] . 河南医科大学学报,2019 ,32 (4) :78279. [ 7 ] 　Kreher U , Darius J , Wien F. Establishing individual metabolite pa