琼脂糖珠培养.pptVIP

原生质体培养方法; 液体浅层培养:Liquid thin layer culture 将含有原生质体的培养液在培养皿底部铺一薄层，封口后进行培养 优点：操作简单，对原生质体的损伤小，且易于添加新鲜培养基和转移培养物 缺点：原生质体分布不均匀，常发生原生质体粘连现象而影响其进一步生长和发育；难以跟踪观察某一个细胞的发育情况；一旦污染，全皿报废; 固体平板培养:Solid culture 固体培养也就是琼脂糖包埋培养。低融点琼脂糖可在30?C左右融化与原生质体混合而不影响原生质体的生命活动。混合后的含有原生质体的培养基铺于培养皿底部，封口后进行培养 优点：可以跟踪观察单个原生质体的发育情况，易于统计原生质体分裂频率 缺点：操作要求严格，尤其是混合时的温度掌握必须合适，温度偏高则影响原生质体的活力，温度偏低则琼脂糖凝固太快原生质体不易混合均匀; 液体－固体双层培养:Liquid solid culture 即在培养皿底部铺一层琼脂糖固体培养基，再将原生质体悬浮液滴于固体培养基表面 优点：固体培养基中的营养物质可以缓慢释放到液体培养基，如果在下层固体培养基中添加一定量的活性炭，则还可以吸附培养物产生的一些有害物质，促进原生质体的分裂和细胞团的形成 缺点：不易观察细胞的发育过程;Semi-permeable membrane on solid medium;; 琼脂糖珠培养:Agarose