定量PCR操作流程(图形).ppt

快速导入模板方法 快速导入模板功能 如何观察结果 * 双击该图标，打开软件 出现此界面，确认 选择为第一个（ Quantitative PCR）， 点击OK 此处3个按钮，自左向右 依次为设置、运行、分析 选中实验中所用的孔，与仪器上相对应 随后在Well type的下拉选框里选择相应 的Unknown（待测样本）、NTC（阴性 对照）、NPC(阳性对照)。 选中Unknown孔，随后在Collect Fluorescence data 下面的FAM打上勾。对PTC、NTC做同样的操作 1.选中实验中A行所用的孔以及H2、H3，选择Assign Assay Names 2. 在弹出的Well annotation窗口选Assign Assay with selected wells ，在Dye项选FAM ，在Assay项编辑探针名称，如Flua，在Assay Color选该探针的曲线染色，如蓝色。按Cloes退出。 B行、C行、阴性、阳性对照操作与A的操作方法相同。 最后选Thermal Profiles Setup进入反应程序设定 选Delete 多余的步骤。 选segment 添加2个步骤 以Segment 2 为例，设定程序。 选play with Ramp,添加子步骤 点击温度项，设定温度 点击时间项，设定时间 设定循环数 设定荧光检测时间点，把End point 拉到segment 3的 55度 当板、程序全部设置 完全后，点击Run进 入 运行界面。点击Start（如果两次时间间隔较长最好把Turm lamp off at end of run 选上） 点击Start会弹出此保存对话框 选择合适的路径，保存实验结 果，并开始实验。实验结束后 无需再次保存。 假如 已有实验结果，日后进行 同类实验时可直接使用Import （模板导入）功能。点击Import 弹出此对话框，找到作为模板的 文件，打开即可导入板设置。 *