色谱例题.pptx

;解：先求出组分2对组分1的相对保留值r2，1（即α值）;; 因此,欲使分离度达到1.2,需有效塔板数为2788块,则所需柱长为 L=2788/1329×1m=2.25m;[例18-2] 已知某色谱柱的理论塔板数为3600,组分A和B在该柱上的保留时间为27mm和30mm,求两峰的峰半宽和分离度. ; ; [例18-4] 已知物质A和B在一个30.0cm柱上的保留时间分别为16.40和17.63分钟.不被保留组分通过该柱的时间为1.30分钟.峰宽为1.11和1.21mm,计算: (1)??柱分辨本领;(2)?? 柱的平均塔板数目;(3)?? 塔板高度;(4)?? 达到1.5分离度所需的柱长度;(5) 在较长柱上把物质B洗脱所需要的时间. ; 解: (1) R=2(17.63-16.40)/(1.11+1.21)=1.06 (2) nA=(16.40/1.11)2=3493 nB=16(17.63/1.21)2=3397 nav=(3493+3397)/2=3445=3.44×103 (3) H=L/n=30.0/3445=8.708×10-3cm =8.71×10-3cm (4) n2=3445×2.25/1.124=6.90×103 源于(n1/n2=R1/R2)2 L=nH=6.90×103×8.71×10-3=60.1cm (5) tr2=tr1(R2/R1)2=17.63×1.52/1.062 =35.3分钟 ; 内标法的关键是选择合适的内标物，它必须符合下列条件： （1）内标物应是试样中原来不存在的纯物质，性质与被测物相近，能完全溶解于样品中，但不能与样品发生化学反应。 （2）内标物的峰位置应尽量靠近被测组分的峰，或位于几个被测物之峰的中间并与这些色谱峰完全分离。 （3）内标物的质量应与被测物质的质量接近，能保持色 谱峰大小差不多。;内标法的优点： （1） 因为ms / m比值恒定，所以进样量不必准确； （2）又因为该法是通过测量Ai / As比值进行计算的，操作条件稍有变化对结果没有什么影响，因此定量结果比较准确。 （3）该法适宜于低含量组分的分析，且不受归一法使用上的局限。; 内标法的主要缺点：每次分析都要用分析天平准确称出内标物和样品的质量，这对常规分析来说是比较麻烦的；其次，在样品中加入一个内标物，显然对分离度的要求比原样品更高。;3.外标法 外标法实际上就是常用的标准曲线法。首先用纯物质配制一系列不同浓度的标准试样，在一定的色谱条件下准确定量进样，测量峰面积（或峰高），绘制标准曲线??? 进样品测定时，要在与绘制标准曲线完全相同的色谱条件下准确进样，根据所得的峰面积（或峰高），从曲线查出被测组分的含量。;练习题;解 ： （1）柱的分离度 R = 2（17.63 - 16.40）/（1.11 + 1.21） = 1.06 （2）柱的平均塔板数 n = 16 (16.40 /1.11)2 = 3493 n = 16 (17.63 /1.21)2 = 3397 n平均 = （3493 + 3397）/ 2 = 3445 ; （3）达到1.5分离度所需的柱长度 R1 / R2 = ( n1 / n2 )1/2 n2 = 3445 (1.5 / 1.06)2 = 6898 L = nH = 6898?(300 /3445) = 60 cm