激活蛋白酶活化受体2抑制肺癌细胞凋亡-中国药理学通报.PDF

·６８４· 中国药理学通报　ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ　２０１４Ｍａｙ；３０（５）：６８４～８ 网络出版时间：２０１４－４－１８１４：１３　网络出版地址：ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｏｉ／１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－１９７８．２０１４．０５．０２１．ｈｔｍｌ 激活蛋白酶活化受体２抑制肺癌细胞凋亡 １ １ １ １ ２ 黄邵洪 ，安　军 ，李　昀 ，张军航 ，荣　健 （１．中山大学附属第三医院胸心外科，广东广州　５１０６３０；２．中山大学附属第一医院麻醉科，广东广州　５１００８９） ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－１９７８．２０１４．０５．０２１ Ｂａｘ／ＢｃｌｘＬ比率是凋亡过程的一个指标。Ｂａｘ／Ｂｃｌ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００１－１９７８（２０１４）０５－０６８４－０５ ｘＬ比率如何调节目前仍不清楚。 中国图书分类号：Ｒ３２９．２５；Ｒ３９２．１１；Ｒ７３４．２０２．２；Ｒ９７７．３ 大量研究提示表皮生长因子受体（ｅｐｉｄｅｒｍａｌ 摘要：目的　观察蛋白酶激活受体２（ＰＡＲ２）活化对肺癌细 ｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＥＧＦＲ）与肺癌发生密切相 胞株Ａ５４９表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）表达及凋亡影响。方 ［８－９］ 关 。抑制ＥＧＦＲ表达则是许多抗癌药物的作用 法　在Ａ５４９及ＥＧＦＲ基因沉默的Ａ５４９细胞株培养液中加 ［１０］ 基础。抑制 ＥＧＦＲ表达能增强细胞凋亡 。人体 入类胰蛋白酶，用定量ＲＴＰＣＲ及Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测ＥＧＦＲ 表达，观测细胞凋亡情况及与Ｂａｘ／ＢｃｌｘＬ表达水平。结果　 内ＥＧＦＲ的天然增强因素并不清楚。有观点认为肥 与类胰蛋白酶共培养４８ｈ后，Ａ５４９细胞ＥＧＦＲ表达明显增 大细胞生成的类胰蛋白酶（ｔｒｙｐｔａｓｅ）会抑制凋 ［１１］ 加。凋亡比例明显降低，而且这种降低呈现剂量浓度依赖 亡 。肺癌细胞株 Ａ５４９，能够表达蛋白酶激活受 ［１２］ 性。细胞中Ｂａｘ表达明显减少而 ＢｃｌｘＬ明显增加。ＥＧＦＲ 体２（ｐｒｏｔｅａｓｅａｃｔｉｖａｔｅｄｒｅｃｅｐｔｏｒ２，ＰＡＲ２） 。由 基因沉默后，类胰蛋白酶对Ａ５４９细胞凋亡的抑制作用被阻 此，我们猜想类胰蛋白酶是通过激活ＰＡＲ２来调节 断，对Ｂａｘ／ＢｃｌｘＬ比率亦无影响。结论　类胰蛋白酶能增加 ＥＧＦＲ表达，进而抑制癌细胞凋亡的。为验证该设 肺癌细胞株Ａ５４９ＥＧＦＲ表达，减少其凋亡，明显减少 Ｂａｘ表 想，我们用Ａ５４９细胞株作为研究对象，将其暴露于 达而增加ＢｃｌｘＬ表达。 类胰蛋白酶下培养，观察ＥＧＦＲ表达及细胞凋亡情 况。 关键词：表皮生长因子受体；蛋白酶激活受体２；肺癌；凋 １　材料与方法 亡；Ｂａｘ；ＢｃｌｘＬ １．１　试剂　ＥＧＦＲ（Ａ１０），ＰＡＲ２（Ｃ１７），Ｂａｘ （６Ａ７）和ＢｃｌｘＬ（Ｈ５）抗体及ＥＧＦＲｓｈＲＮＡ沉默试 　　肺癌是全球人口主要死因之一，其病因及发病 剂盒均购自Ｓａｎ