环磷酸腺苷反应元件结合蛋白调控转化生长因子β1对-口腔疾病防治.PDF

·428 · 口腔疾病防治 2018年7月 第26卷 第7期 ［DOI］10.12016/j.issn.2096⁃1456.2018.07.004 ·基础研究 · 环磷酸腺苷反应元件结合蛋白调控转化生长因 子β1对人根尖牙乳头干细胞分化的作用 顾雪凝， 权家苗， 郭雨晴， 李颂 安徽医科大学口腔医学院·附属口腔医院牙体牙髓科，安徽省口腔疾病研究中心实验室，安徽 合肥（230032） 【摘要】 目的 观察过表达第二信使环磷腺苷反应元件结合蛋白（cAMP⁃responsiveelement⁃bindingprotein， CREB）调控转化生长因子β1（transforminggrowthfactor⁃beta，TGF⁃β1）对人根尖牙乳头干细胞（humanstem cellsfromtheapicalpapilla，hSCAPs）分化的作用。方法 通过采用酶消化法培养hSCAPs，实验分成4组：① Control组，即正常矿化诱导液（α⁃MEM、10%FBS、10mmol/L β⁃甘油磷酸钠、50 μg/ml维生素C、10nmol/L地 塞米松）；②TGF⁃β1组，加入正常矿化诱导液后，加入5 μg/mLTGF⁃β1；③TGF⁃β1+LV⁃empty组，除正常矿化诱 导液外，加入转染空病毒载体和TGF⁃β1，TGF⁃β1浓度为5 μg/mL；④TGF⁃β1+ov⁃CREB组，除正常矿化诱导液 外，加入转染过表达CREB病毒载体和TGF⁃β1，TGF⁃β1浓度为5 μg/mL。矿化培养2周后，通过茜素红染色观 察各组矿化结节形成情况，实时荧光定量PCR法检测各组矿化相关基因，Runt相关基因2（runt⁃relatedtran⁃ scriptionfactor2，RUNX2）、牙本质涎磷蛋白（dentinsialophosphoprotein，DSPP）和碱性磷酸酶（alkalinephospha⁃ tase，ALP）mRNA的表达。结果 TGF⁃β1作用SCAPs后，与Control组（1.12±0.11）相比，抑制矿化结节的形成 （0.67±0.12）（P＜0.05）；下调矿化基因RUNX2（0.60±0.03）、DSPP（0.43±0.12）、ALP（0.69±0.05）的mRNA表 达（P＜0.05）。过表达CREB后逆转TGF⁃β1对SCAPs分化的抑制作用，与TGF⁃β1组相比，促进矿化结节的形 成（1.27 ±0.10）（P＜0.01）并上调RUNX2（1.33±0.07）、DSPP（1.32±0.11）和ALP（1.26 ±0.03）mRNA的表达 （P＜0.05）。结论 过表达转录因子CREB能够逆转TGF⁃β1对hSCAPs分化的抑制作用，促进其分化。 【关键词】 环磷酸腺苷反应元件结合蛋白； 转化生长因子β1； 根尖牙乳头干细胞； 成牙本质细胞； 分 化； 矿化； Runt相关基因2 【中图分类号】 R781 【文献标识码】 A 【文章编号】 2096⁃1456(2018)07⁃0428⁃06 【引用著录格式】 顾雪凝,权家苗,郭雨晴,等.环磷酸腺苷反应元件结合蛋白调控转化生长因子β1对人根 尖牙乳头干细胞分化的作用[J]. 口腔疾病防治,2018,26(7):428⁃433. cAMP⁃responsive⁃element⁃bindingproteinpromotesthedifferentiationofhumanstemcellsfromtheapicalpa⁃ pillaviainhibitionoftheTGF⁃β1pathway GUXuening,QUANJiamiao,GUOYuqing,LISong. Stomatologic HospitalCollege,AnhuiMedicalUniversity,KeyLaboratoryofOralDiseasesResearchofAnhuiProvince,Hefei 230032,China Correspondingauthor:LISong,Email:3197053337@,Tel.:0086⁃551 【Abstract】 Objective ThisstudyaimedtoinvestigatetheeffectofcAMP⁃