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牛冷冻精液的保存及解冻
牛冷冻精液的保存及解冻
精液冷冻保存是将精液进行特殊处理,保存在超低温下,以达到长期保存的目的。通常采用液氮(-196℃)保存。其最大优点是可长期保存,使用不受时间、地域以及种用雄性动物寿命的限制。可充分提高公牛的利用率。现将冷冻精液保存和解冻的有关技术操作介绍如下。
一、稀释液的配方:
12%的蔗糖液75毫升、甘油5毫升、卵黄液20毫升。
二、稀释方法:
将经过检查合格的精液(活力0.6以上、精子密度中等)按1:2-5倍稀释液进行稀释,其稀释原则应保证每个颗粒精液中所含精子数不少于3000-4000万个,解冻后呈直线前进运行的精子不少于15000万个。
三、冷冻:
在装有液氮的容器上置一铜纱网,距液氮面2厘米左右,使温度维持在-80℃至-110℃。将平衡后的精液用滴管按一定量(0.1ml/滴)滴于铜纱网上,滴完最后一滴精液后,在液氮蒸汽中平衡3-5分钟后,当精液颗粒颜色变白时,立即浸入液氮,并将全部颗粒取下,收集于贮精瓶或纱网布袋内,并做好标记,然后立即移入液氮罐中贮存。
四、解冻:
取预先配制好的9%的柠檬酸溶液1毫升,放入干净的小试管中,再置于40℃左右的温水杯中,迅速取颗粒冷冻精液1粒放入试管,待颗粒三分之二融化后,从水杯中取出试管迅速摇动使颗粒完全融化,接着检查精液活力,不低于0.3即为合格品。
五、重视保精、快速解冻与镜检
1、根据液氮罐的性能要求,定期添加液氮罐内盛装冻精的提筒不能露在液氮面外。
2、取精时,尽可能用长镊子,切勿将提筒或纱布袋提到临界线以上处(罐顶10厘米左右)。
3、从液氮中取出细管冻精时,要轻轻甩1-2下,将塑料细管的棉塞端放入35-40℃的温水中,把封口端留在水外1-1.3厘米外,待管内精液融化一半时,立即取出备用。
4、解冻后的精液镜检时,精子的活力不低于0.3方可用于输精,才能确保正常受精。
5、解冻后的精液应立即输配,不宜停放时间过长,应做到现解冻、现输精。
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