药品生产过程中的微生物污染及控制.pptVIP

微生物基础知识、污染及控制 胡静 2012.08 内容 微生物的种类和特点 为什么要进行微生物污染控制 生产过程中微生物污染的途径 如何控制微生物污染 微生物 微生物定义：微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物 大小：个体微小，一般0.1mm 最大：1997年，由Heidi Schulz在纳米比亚海岸海洋沉淀土中所发现的呈球状的细菌，直径约100～750μm。 最小：支原体，大小约为100纳米。 微生物分类 一般地，在中国大陆地区的教科书中，均将微生物划分为以下8大类： 细菌、病毒、真菌、放线菌（广义上属于细菌的一种）、立克次体、支原体、衣原体、螺旋体。 微生物特点 个体小，比表面积大（m2/g） 吸收多，转化快 ：自养、异养 生长旺，繁殖快 ：几十分钟一代 适应强，易变异 ：突变 分布广，种类多 ：病毒界、原核生物界、原生生物界、真菌界，极端环境也存在 微生物生长条件 水分和无机盐 适宜的温度、湿度 氧气 能源物质（碳源和氮源） pH值 生长因子 微生物益处 自然界中氮、碳、硫等多种元素循环靠微生物的代谢活动来进行 例：固氮菌每年从空气中约固定1．5亿吨氮肥 根瘤菌属（Rhizobium）的细菌与豆科植物共生形成根瘤共生体 微生物益处 食品发酵：酸奶、啤酒 药物提取：抗生素 微生物杀虫剂：苏云金芽孢杆菌 生物除污：降解塑料、处理废水废气等 工艺改造：工程菌株基因的研究 生物工程领域：嗜极菌的研究 病原微生物 细菌：皮肤病化脓、上呼吸道感染、泌尿道感染、食物中毒，败血压症，急性传染病等 真菌：皮肤病 病毒：狂犬病、艾滋病毒、SARS 放线菌：皮肤、伤口感染 立克次体： 斑疹伤寒 螺旋体：梅毒 衣原体：沙眼、泌尿生殖道感染 支原体：肺炎、尿路感染 微生物研究方法 分离纯化 鉴定 菌落形态：肉眼观察 菌体形态：镜检观察 生理生化实验 分子生物学实验 菌种保藏、复壮 细菌 绝大多数细菌的直径大小在0.5~5μm之间，需要染色后借助显微镜观察，放大倍数10×100 按形态分杆菌、球菌、螺旋菌、弧菌等 细菌 单细胞，原核生物 结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、核质、荚膜、鞭毛、菌毛、少量细胞器 细菌生长条件 水分：必要 通常37℃适合病原菌生长 ，2010版药典规定培养温度：30~35℃（适宜中温菌和一些高温菌的生长），培养时间3天。 氧气：需氧、厌氧、兼性 pH：7.2~7.6条件下，多数细菌体内酶的活性最强 生长因子：部分细菌 细菌 多以二分裂方式繁殖 营养方式有自养和异养型 绝大多数细菌是异养型 少量如光合细菌（含有细 菌叶绿素，能进行光合作 用自养）为自养型细菌 细菌 革兰氏染色法将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌 分类意义：大多数化脓性球菌都属于革兰氏阳性菌，它们能产生外毒素使人致病，而大多数肠道菌多属于革兰氏阴性菌，它们产生内毒素，靠内毒素使人致病。 在治疗上，大多数革兰氏阳性菌都对青霉素敏感 ，而革兰氏阴性菌则对青霉素不敏感 芽孢细菌 芽孢：有些细菌（多为杆菌）在一定条件下，细胞质高度浓缩脱水所形成的一种抗逆性很强的球形或椭圆形的休眠体。 特点：抗性强，对高温、紫外线、干燥、电离辐射和很多有毒的化学物质都有很强的抗性，有很强的折光性 芽孢形成既不是细菌生活周期的必经阶段，也不是细菌繁殖的一种形式，又不是一种消极的对环境的反应，而是一个新器官的积极生成。 芽孢细菌 芽孢杆菌：好氧菌(Bacillus) 枯草芽孢杆菌 梭状芽胞杆菌：厌氧菌(Clostridium) 破伤风杆菌 球菌：芽孢八叠菌（Sporosarcina） 弧菌：芽孢弧菌属 (Sporovibrio）?? 芽孢杆菌的杀灭 物理方法 高温间歇灭菌法：脉动真空灭菌 辐射灭菌法：γ射线 化学方法 消毒剂杀灭：甲醛、环氧乙烷、戊二醛、及过氧乙酸等 真菌 单细胞或多细胞，真核生物 单个细胞一般10μm，营养体肉眼可见 通常分为酵母菌、霉菌和蕈菌 真菌 结构：细胞壁、细胞膜、细胞核、细胞质、细胞器 有独立的细胞核结构（核膜、核仁） 真菌 繁殖方式：无性生殖、有性生殖 真菌 营养方式：异养 腐生：利用死去的动植物提供的有机物生长（白腐菌、褐腐菌） 寄生：寄宿在活的动植物体内，吸取养分（曲霉、毛霉、青霉） 共生：与动植物同存亡（地衣、外生菌根） 真菌生长条件 真菌营养要求不高，需氧或兼性厌氧，生长繁殖最适pH接近中性，最佳温度为25~30℃，但某些深部真菌为37℃，与人体温度相同，需一定水分，营养物质等。 2010版药典规定真菌培养温度23~28℃，培养时间5天。 真菌杀灭 消毒剂：醇类、酚类、含氯制剂、含碘制剂、醛类、强氧化剂（过氧乙酸、臭氧、二氧