动物实验质量控制的意义.pptVIP

第九节 影响动物实验效果的 动物实验技术环节因素 一、动物选择 应按照不同实验的要求选择合适的动物。如作肿瘤的研究工作，就必须了解哪种动物是高癌种，哪种是低癌种，各种动物自发性肿瘤的发生率是多少。 二、实验季节 生物体的许多功能随着季节产生规律性的变动。如，不同季节对辐射效应有影响。 三、昼夜过程 人和动物的生命活动存在昼夜规律性变动。研究发现：小鼠、大鼠和猴等动物的血液成分如白细胞、红细胞、血红蛋白、单核细胞和嗜酸性粒细胞与血液生化值，普遍存在日夜节律，部分参数具有24小时周期性。 抗病力和易感性也可能存在日夜节律。 动物对照射的敏感性在昼夜间有不同的变化，白天放射敏感性降低，夜间升高。 体温、血糖、基础代谢率、内分泌激素的分泌均发生昼夜节律性变化。 四、麻醉深度 动物实验中往往需要将动物麻醉后才能进行各种手术和实验。要求麻醉深度要适度，而且在整个实验过程中要保持始终恒定。如果麻醉过深，动物处于深度的抑制，甚至濒死状态，动物各种正常反应受到抑制，那是不会做出可靠的实验结果的。麻醉过浅，在动物身上进行手术或实验，将会引起强烈的疼痛的刺激，使动物全身，特别是呼吸、循环功能发生改变，消化功能也会发生改变，如疼痛刺激会反射性地长时间中止胰腺的分泌。所以麻醉深度必须合适。 五、手术技巧 手术熟练可以减少对动物的刺激，动物受的创伤、出血等就少，将会提高实验成功率和实验结果的正确性。 六、对照问题 一般对照的原则是“齐同对比”。对照方法很多，有空白对照、实验对照`、有效（或标准）对照、配对对照、组间对照、历史对照以及正常值对照等。 1．空白对照是在不给任何措施情况下观察动物自发变化的规律，以排除非实验因素带来的影响。 2．实验对照是采用与实验组相同操作条件的对照，如给药实验中的溶媒或其它赋形剂、手术、注射以及观察抚摸等都可以对动物发生影响。 3．有效（或标准）对照：常用于药物研究。对一新药的疗效要用一已知的有效药或能引起标准反应的药物做对照，这样既可考核实验方法的可靠性，又可通过比较了解新药的疗效和特点。 4．配对对照：是同一个体在前后不同时间比较对照期和实验期的差异，或同一个体的左右两部分作对照处理和实验处理的差异，这样可大大减少抽样误差。 5．组间对照：是将实验对象分成两组或几组比较其差异。这种对照个体差异和抽样误差比较大。组间对照可用交叉对照方法以减少误差。。 6．历史对照与正常值对照 这种对照要十分慎重，必须要条件、背景、指标、技术方法相同才可进行对比，否则将会得出不恰当的甚至错误的结论。 7．实验重复和肯定　选用动物一方面要数量合适，不造成浪费，另一方面也应做必要的重复实验。有些实验单做一种动物还不够，应当重复做几种动物。 由于不同种属动物有不同的功能和代谢特点，所以在肯定一个实验结果时最好采用两种以上的动物进行比较观察，其中一种应该是非啮齿类动物。尤其是动物实验结果要外推到人的实验，所选用的动物品种应不少于3种，而且其中之一不应是啮齿类动物。常用的生物序列是小鼠--大鼠--狗（或猴）。 * * 2222 2．药物代谢动力学 在不同种属动物身上做的实验结果有较大差异，主要由于其药物代谢动力学不同，药效就不同。吸收过程差异：如大鼠吸收碘较家兔和豚鼠快，药效也有差别。排泄过程差异：如大鼠体内的巴比妥在3天内可排出90%以上，而鸡在7天内仅排出33%，因而巴比妥对鸡的毒性比对大鼠要大得多。 3.药物反应性 不同种属动物对药物的反应也有差异。如啮齿类实验动物和家兔对催吐药不产生呕吐反应，在犬、猫和人则易产生呕吐。苯胺及其衍生物对犬、猫和豚鼠能引起与人相似的病理变化，产生变性血红蛋白；对家兔则不易产生变性血红蛋白，而小鼠则完全不产生。 4．生理学差异 不同种属动物的基础代谢率相差很大，以单位体重的基础代谢率而言，小动物比大动物要高。因此，一般地说，动物越小，其所需的单位体重的药物剂量就越大。 5．遗传差异 有学者认为：动物实验中的差异25%归于遗传差异，75%则归于环境影响。如Gunn鼠先天缺乏胆红素—葡萄糖醛酸转移酶，易发生黄疸；D绵羊的红细胞缺少葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G-6-PD），易发生溶血。  二、品种与品系 不同品系、品种之间存在基因多态性，具有不同等位基因或不同基因型。其对动物实验所给予的外来刺激所表达的反应是不同的，使用不当也会影响动物实验的结果。 近交系实验动物由于其基因型、表现型相同，故对刺激的反应性一致，实验结果的重复性、可比性极好；封闭群动物由于遗传组成具有很高的杂合性，个体间反应性具有差异，故个体间重复性和一致性没有近交系动物好。 不同品系实验动物遗传上的差异，造成其形态与功能的差异，并导致对同一刺激产生不同的反应。有人观察不同品系雄性小鼠暴露于相同浓