第14章核酸的物理化学性质.docVIP

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  • 2019-07-28 发布于福建
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第十四章 核酸的物理化学性质 第一节 核酸的水解 一、酸水解 糖苷键比磷酸酯键更易水解,特别是嘌呤与脱氧核糖之间的糖苷键很容易水解。 二、碱水解 通常用于RNA 水解,DNA 的碱水解比较困难。 三、酶水解 DNA 与限制性内切酶: 双链DNA 分子可以被上千种从微生物中分离得到的限制性内切酶(restriction enzyme)切断,又可以再连接起来。切断的过程不需要能量,而连接的起来的过程却需要2 个分子的ATP。这就是分子克隆和DNA 重组技术的基础。 大部分限制性内切酶识别的碱基序列为4~6 个碱基的palindrome 顺序。它们在微生物细胞内发挥iu的是防御外来DNA 入侵的国防军的作用。 第二节 核酸的酸碱性质 碱基配对时碱基一般以酮式存在,而不是醇烯式。 碱基中的H 原子一般不移动,因此很少有亚氨基团。 在中性pH 条件下,参与氢键的-NH2 基均不带电荷,这是杂环电子共轭以及氢键共同作用的结果,否则双螺旋结构不会稳定。 碱基 核苷 核苷酸 第三节 核酸的紫外吸收 第四节 核酸的变性、复性及杂交 DNA 分子的变性 DNA 的均一性越高,Tm 的温度范围越小。 G-C 含量越高,Tm 的值越大,当GC 的含量上升1%,则Tm 上升0.4℃。马默多蒂(Marmur-Doty)关系式:Tm=69.3+0.41(G+C)%,或GC%=(Tm-69.3)×2.44 介质的

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