凝胶的浓度-聚生物网.ppt

浓缩胶 分离胶 样品 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳装置 点样 浓缩胶 分离胶 样品 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳装置 电泳结果 每条带代表不同分子量的蛋白质或者肽段,这样蛋白质就分离开了 2.毛细管电泳 ① 泛指高效毛细管电泳、毛细管区带电泳、自由溶液毛细管电泳和毛细管电泳。 ② 用途:分离多种生物分子,包括氨基酸、肽、蛋白质、DNA片段(例如合成的寡核苷酸)和核酸以及多种小分子,如药物、甚至金属离子。用样量5~30μl 1mg/ml溶液。 3.等电聚焦电泳 等电聚焦或称电聚焦,是一种高分辨率的蛋白质分离技术,它也可用于蛋白质等电点的测定。 蛋白质混合物是在具有pH梯度的介质(如浓蔗糖溶液)中进行电泳的。在外电场作用下各种蛋白质将移向并聚焦(停留)在等于其等电点的pH梯度处,并形成一个很窄的区带。 等电聚焦可以把人的血清分成40多个条带。此技术特别适用于同功酶的鉴定。只要它们的pI有0.02(甚至0.02)pH单位的差别就能分开。 实际上是利用缓冲液在电场作用下在凝胶内沿电场方向制造一个pH梯度。所用的缓冲液是低分子量的有机酸和碱的混合物,该混合物称之两性电解质。 等电聚焦电泳装置 当蛋白质样品在这样的凝胶上电泳时,每种蛋白质都将迁移至与它的pI 相一致的pH处,具有不同pI的各种蛋白质最后都迁移至凝胶中相应的pH处,达到分离的目的。 4.蛋白质的双向电泳(two-dimensio

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