制备加压色谱.pptVIP

中分离得到口山酮类化合物。他们先将甲醇提取物用SephadexLH一20进行分离，所得富含糖苷的部位(300mg)继续用RP一18色谱柱进行中压液相色谱分离，共得到6个口山酮类化合物。所用的分离条件先由分析型HPLC分析确定。 表5．7归纳了用中压液相色谱对各类天然产物进行分离的一 5．1．1l色谱柱的过载和中心切割 为提高制备型分离能力，可使色谱柱超载(使质量或浓度超载。而非容积超载)。由于分离不是在线性条件下进行，最佳的分离条件无法再从分析型数据来预测。在利用“中心切割”技术进行分离时，需避免主要色谱峰前后两端微量组分的污染(图5．7)。 用这种方法进行分离，可能损失少量的a，但a的产量却可提高。在实际分离过程中，可逐渐加大上样量直至达到适当的超载程度，并通过中心切割得到一不受色谱峰前后杂质污染的产物。硅胶类固定相的超载量可由每克固定相超载样品lmg起开始摸索(Herbert，1991)。 为达到最大承载的目的，样品应尽可能溶在比流动相溶解能力差的溶剂中。 Farmakalidis和Murphy(1984)利用中心切割法从大豆中分离异黄酮类成分染料木苷(genistin)和大豆苷(daidzin)。也可用超载上样法从混合物中分离微量成分，如图5．8所示，通过切割超载上样的色谱柱得到一富含a的流分，对其再进行一次分离即可得到纯的化合物a。 5．1