最低检测限与.pptVIP

一、血清总蛋白测定 * (双缩脲法测定血清总蛋白) 教学要求与目的 掌握： 1.线性试验的原理、用途。 2.最低检测限的定义及其评价方法。 3.血清总蛋白的测定原理及操作方法。 熟悉： 1.可报告范围、分析测量范围的概念。 2.生物检测限与功能灵敏度的概念。 3.血清总蛋白测定的临床意义。 凯氏定氮法 参考方法 双缩脲法 常规测定方法 酚试剂法 染料结合法 浊度法、紫外光谱法 （一）实验原理 蛋白质 + Cu 在540nm波长处有吸收峰，在一定浓度范围内其吸光度增加与蛋白含量成正比，由此可求得蛋白质含量。 OH 2+ 紫红色络合物 （二）实验试剂 1、双缩脲试剂 2、标准液　本试剂盒为总蛋白　50g/L 氢氧化钠 酒石酸钾钠 硫酸铜 碘化钾 （三）操作方法 1、操作参数： 　波长：540nm　温度：37℃ 　测定模式：终点法 2.操作步骤 1000 1000 1000 双缩脲试剂 20 血清 20 标准液 20 DH2O U S B （ul） 混匀，37℃水浴10分钟，在540nm波长处，用空白管调零，读取各管吸光度。 3、计算 血清总蛋白(g/L) = 测定管吸光度 标准管吸光度 × 蛋白标准液浓度 （50g/L） 参考值：60－83g/L （四）注意事项 严重溶血和黄疸可使测定结果偏高,可 作标本空白管消除。 2.脂肪乳糜干扰比色，可加