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实验五 神经干复合动作电位的记录与观察 【目的要求】1、学习电生理学实验方法。 2、观察与记录蛙坐骨神经干复合动作电位的波形,并了解其产生的原理。 【实验原理】 神经干在受到有效刺激后,可以产生动作电位,标志着神经发生兴奋。在神经干的另一端引导传来的兴奋冲动,可以引导出双相的动作电位。 神经细胞的动作电位是以“全或无”方式发生的。坐骨神经干是有很多不同类型的神经纤维组成的,所以,神经干的动作电位是复合动作电位。复合动作电位的幅值在一定刺激强度下是随着刺激强度的变化而变化。 【实验动物及器材】 蟾蜍、常用的手术器械(手术剪、手术镊、手术刀、金冠剪、眼科剪、眼科镊、毁髓针和玻璃分针)、PcLab-UE生物医学信号采集系统、解剖盘、蛙板、铜锌弓、培养皿、污物缸、滴管、纱布、粗棉线、任氏液、神经屏蔽盒 【实验步骤】-1 1、制备坐骨神经干标本(尽可能长和完整),并在任 氏液中稳定15分钟左右。 2、连接神经屏蔽盒与计算机采集系统。 3、仪器操作及实验参数设置 1)打开PcLab生物信号采集系统 采用动作电位传导速度或神经干不应期或神经干复合动作电位模块,系统自动设置刺激参数。 刺激模式:单刺激(根据实验需要调节); 幅度范围:0-5V; 幅度:0.3V(可根据刺激需要调节); 波宽:0.1ms, 延时:5ms(可根据显示需要调节)。 【实验步骤】-2 2)采样窗参数的设置: 采样条件设置: 显示方式:示波器; 触发方式:刺激器触发; 采样频率:10KHZ/1KHz; 通道个数:2个通道。 4、将蛙的坐骨神经干标本置于神经屏蔽盒内的电极 上,神经干的中枢端置于刺激电极一侧,从末梢端引 导动作电位。 【实验步骤】-3 5.刺激、观察与记录神经干复合动作电位。 1)神经干兴奋阈值的测定。 点击“采样”按钮,采样窗开始扫描,调节刺激强度(或者采用自动幅度刺激),测定神经干兴奋阈值。 2)引导双相动作电位(打印图形)。 在刺激阈值的基础上增加刺激强度,可以引导出双相的动作电位,且它的幅值随刺激强度的增大加大,当刺激增加到一定的强度时,可见动作电位的幅值 不再增大。 【实验步骤】-4 3)测量动作电位的各个参数 点击“测量”按钮,移动鼠标,测出动作电位的波幅、波宽(分上相、下相的波幅和波宽)。 4)引导单相动作电位并测量其波宽和波幅。 (放在实验结束时再做) 【实验结果】 1、神经干兴奋阈值的测定 2、引导并测量出的双相动作电位 3、引导并测量出的单相动作电位 【分析讨论】 分析实验结果 【结论】 实验注意事项: 1、神经干不能太干也不能太湿,剥离完整后在任氏液体中稳定15分钟左右,取出用滤纸吸干周围的任氏液。 2、神经干放置在引导电极上时,尽量拉直,勿使下垂或斜向放置,以免影响神经干长度测量测准确性。 3、神经干要尽可能长,两个引导电极之间的距离越远,测量的传导速度就越准确。 思考题: 1.3.4
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