气相高效液相色谱法简介.pptVIP

2、进样系统 通常采用六通伐进样： 色谱柱 色谱柱 泵 泵 1 2 进样 荧光分析法——与可见紫外及红外分光光度法同属于分子吸收光谱，用于测量微量及限量分析。 原理：当用紫外线照射样品时，样品能发射出反映该物质特性的荧光光谱及荧光强度，由此来进行物质的定性和定量分析的方法为荧光分析法。 极谱分析——光学分析的一种。 气相色谱仪的操作 (一)基本操作 1、气体钢瓶的正确使用： 钢瓶气由气体厂提供，其纯度可分为普级和高纯级。前者纯度为99.9%以上，后者纯度为99.99%以上。填充柱气相色谱一般使用普级即可满足要求，毛细管柱气相色谱则最好用高纯级气体作载气。气瓶颜色：氢气为绿底红字，氮气为黑底黄字，压缩空气为黑底白字。瓶上注明了纯级。载气纯度不不符合要求，会使基线不稳噪声增大。 （一）基本操作 钢瓶的瓶嘴上有一阀瓣开关。用8号扳手顺时针方向旋转为关闭，逆时针旋转为开启， 在瓶嘴上安装减压表才能开启钢瓶。 2、减压表的安装与正确使用 气相色谱仪使用的各种气体压力为o. 2~O. 5MPa，因此需要通过减压表使钢瓶 气源的输出压力下降。减压表一般分为氢气表和氮气表(氧气表)两种。氮气表可以安装除了氢、乙快和其它燃气瓶以外的各种气瓶上。两种减压表的区别是，氢气表和氮气钢瓶是反扣螺纹，逆时针方向旋紧，顺时针方向松开;而氮气表和氮气瓶 嘴及其他气体都是正扣螺纹。 减压表装有两个弹簧压力表，分别指示钢瓶内和减压后的气体压力。减压后的气体压力可由T阀杆调节。顺时针方向旋转增加出口压力，逆时针旋转则相反。 在每次开启钢瓶阀瓣之前应先检查T形阀杆是否处于放松(关闭出口)位置。如果T形阀杆处于开启位置就开钢瓶的阀瓣节门，则气路系统的压力骤增，容易损坏色谱仪中的阀门。 3、气路检查 气相色谱仪的气路要认真仔细地进行检漏。气路不密封将会在检验过程中出现异常现象，造成数据不准确。用氢气作载气时，氢气若从柱接口漏进柱恒温箱，可能会发生爆炸事故。最常用的检漏方法是皂膜检漏法。 皂膜检漏法： 即用毛笔蘸上中性皂液涂在各接头处检漏，检毕用干布将皂液擦净。 封闭系统压力法检漏 对于安有转子流量计的仪器，用封闭系统压力法检漏则 更方便。将氮气通入气路系统，观察气流是否通畅，然后关闭出口处，当充人0. 3~0. 5MPa 的氮气后，转子流量计的转子若下降到底，则表明流量计以后的气路不漏气。这时再关闭气体入口处，待气压平稳 后读取柱前压力， 0. 5h后再次读取柱前压力，若下降值不超过0.01 MPa，则可认为整个气路不漏气。 （二）气相色谱仪的操作 气相色谱分析所采用的检测器不同，其操作程序有所不同，以具有氢火焰离子化检测器 （FID)色谱仪为例，介绍气相色谱仪的操作。不同的生产厂商、不同型号的气相色谱仪在操作步骤上也有差异，这里只作一般的介绍。 1、开机前的准备 （1）首先安装好色谱柱(不能接反) ，并将色谱柱的末端经连接管接入氢火焰离子化室（又称离子头）进口部位。 （2）检查仪器各部分连接是否正确，检查各稳压阀、针形阀及减压表旋杆是否在关断位置。 （3）开启载气钢瓶、调节减压阀、稳压阀及针形阀，使柱前压和载气流速达到预定值。 （4）进行检漏，当氮气、氢气、空气都试漏完毕，关闭氢气和空气。只留开氮气作载气。 2、开机和色谱条件的设置 （1）打开仪器电源开关，使仪器通电(注意:仪器未接通载气时，切不可通电，否则色谱柱和检测器均可能被烧坏)。 (2)进行仪器的自检，仪器则自动判断整个仪器系统中所有电子电路是否正常。 （3）设置所需柱箱温度、进样口温度和检测器温度(FID检测器的温度应高于110℃，否则点火后会 造成 检测器内积水而影响基线的稳定性) ，并开始升温。 3、点火和色谱测定 （1）打开空气、氢气阀门，分别调节两路气体流量(由流量计显示)为适当值。操作中气体流速一般控制的比例为:氮气:氢气:空气=( 1：1~l.5）:(10~15）。 (2)待检测器温度达到了设定温度后，按动点火键，若听到 爆鸣声或用一光亮的冷金属片放在FID检测器排气口上方，有冷凝水生成，则证明火巳点着。有时可能会点不着火，可加大氢气流量。待点火后，再缓慢减小氢气流量至正常值。 (3)根据需要设置FID微电流放大器的灵敏度，并设置输出信号衰减，调节“零点”电 位器，使FID输出信号在数据处理机或微机图谱的零位附近。 (4)点火后，待仪器稳定0.5h，基线平稳后，即可进行色谱测定。进样后，若出现反峰， 将仪器信号线两个接头对调即可 4、色谱图的分析判断及色谱参数的调整