杨恪鉴超氧化物歧化酶(SOD)的生产.pptVIP

项目四:超氧化物歧化酶(SOD)的生产 任务一：SOD制备方案的制定 生药1121 第五组 2011423242 杨恪鉴  一.SOD的概况 二.SOD的运用 三.SOD的生产 四.SOD的活力测定 一. SOD的概况 1.SOD的概念 超氧物歧化酶（Superoxide Dismutase简称SOD）是一种新型酶制剂。它在生物界的分布极广，几乎从动物到植物，甚至从人到单细胞生物，都有它的存在。SOD被视为生命科技中最具神奇魔力的酶、人体内的垃圾清道夫。SOD是氧自由基的自然天敌，是机体内氧自由基的头号杀手，是生命健康之本。全球118位科学家发表联合声明：自由基是百病之源，SOD是健康之本。体内的SOD活性越高，寿命就越长。 2、SOD的分类 3、作用原理 ⑴基本原理 　SOD属于金属蛋白酶，按照结合金属离子种类不同，该酶有以下三种：含铜与锌超氧化物歧化酶（ Cu-ZnSOD ）、含锰超氧化物歧化酶（ Mn-SOD ）和含铁超氧化物歧化酶（Fe-SOD ）。三种SOD都催化超氧化物阴离子自由基，将之歧化为过氧化氢与氧气。 ⑵人体内的自由基 在细胞由于自由基非常活泼，化学反应性极强，参与一系列的连锁反应，能引起细胞生物膜上的脂质过氧化，破坏了膜的结构和功能。它能引起蛋白质变性和交联，使体内的许多酶及激素失去生物活性，机体的免疫能力、神经反射能力、运动能力等系统活力降低，同时还能破坏核酸结构和导致整个机体代谢失常等，最终使机体发生病变。 4.SOD的理化性质 3.1 SOD对氰化物和H2O2的敏感性 3.2 SOD的吸收光谱特性 3.3 SOD稳定性及影响因素 5.SOD的作用 它催化超氧阴离子转化为H2O2和O2的反应， 即催化超氧阴离子自由基O2-·发生歧化反应， 从而清除O2-·，2O2-·+2H+→H2O2+O2， 在生命体的自我保护系统中起着极为重要的作用， 在免疫系统中也有重要的功，因而它能防御氧毒性，增强机体抗辐射损伤能力，防衰老。 6、测定 超氧化物歧化酶（SOD）的催化底物是O2 ，一般多以一定时间内产物生成量或底物的消耗量作为酶活性单位。由于O2 自身很不稳定，且不易制备，测定SOD的方法除少数采用直接法外，一般多为间接法。 常用的有： 　　⑴ 邻苯三酚自氧化法 ⑵ 细胞色素C还原法（McCord法） ⑶化学发光法 ⑷免疫学方法 ⑸电泳法 3.1 SOD对氰化物和H2O2的敏感性 长时间用过氧化氢处理可使CuZn-SOD和Fe-SOD失活，而Mn-SOD不受影响 3.2 SOD的吸收光谱特性 CuZn-SOD具有独特的紫外吸收光谱。由于色氨酸和酪氨酸的含量较低，它在280 nm处并没有最大吸收峰。 CuZn-SOD的可见光最大吸收波长都在680 nm左右， 这反映了酶分子中Cu2+的光学特性。 3.3 SOD稳定性及影响因素 PH、热、蛋白酶的影响：SOD在pH5.3～9.6间催化性能良好，在pH4.5～pH11间能稳定存在。pH3.6时， CuZn-SOD中95%的Zn要脱落，在pH12.2时，SOD的构象会发生不可逆的转变而使酶失活。 SOD对热的稳定性与溶液中离子强度有关。当离子强度很低时,即使加热到95℃, 其活性损失也很少其他因素：SOD活性受饮料的色泽、成分、酸碱度、乙醇含量等多种因素的影响，只有在无色、近中性、无乙醇饮料中SOD活性较稳定。另外还发现有机溶剂和Cl对SOD的活性具抑制作用 二 SOD的运用 1.药物 SOD是一种新型的抗炎症药， 根据SOD作用机制和毒性试验 ，它对治疗因O2-·引起的各种 疾病都有一定的疗效。为此， SOD可作为抗衰老、抗炎症、自身免疫疾病患者广泛应用的医药品。此外，SOD对治疗贝切特氏症、心肌梗塞等血虚性心脏病、胶原病、新生儿呼吸困难综合症、防御放射性伤害等也可望有效。 二 SOD的运用 2.添加剂 国外不少高级化妆品都添加SOD， 国内也有数家工厂或公司在开发和生产SOD化妆品， 如大宝SOD密，康妮SOD、SOD康舒达霜剂等。SOD作为化妆品添加剂主要有3个优点： （1）有明显的防晒效果 （2）可防皮肤衰老，阻止紫褐质（老年斑）的形成 （3）有明显的抗炎效果，对防治皮肤病有一定效果。 国外把SOD作为食品添加剂的例子是加在口香糖和饮料中。我国贵州农学院已开发出刺梨SOD饮料。SOD及修饰过的SOD还可作为外用药膏、眼药及牙膏等的添加剂 二 SOD的运用 3. 生化试剂 国外已有数家公司如Sigma公司等出售SOD试剂，国内也有厂家批量生产SOD试剂， 如中科院上海生化所东风试剂厂、南京建成