监测行为规范.docVIP

荥阳市主要动物疫病监测行为规范 为加强主要动物疫病监测，规范监测行为，保证监测结果的客观和公正，特制定本规范。 一、采样 采样是例行监测中的重要步骤，是保证监测结果是否具有公正性和代表性的重要环节，采样工作的质量，直接影响到监测结果的质量，因此要高度重视，并认真规范地做好这项工作。 （一）采样的准备工作。 1．各乡镇兽医站应根据市的方案，按照随机抽样的原则，确定采样对象。 2．各级动物防疫监督机构应在每次采样前准备好采样所需要的物品，包括采样登记表、采样单和采样工具等，并由专人负责检查采样工具是否符合要求，避免影响监测结果。 （二）采样工作程序。 1．采样人员不得少于2人，其中一人必须有一定采样工作经验，负责对采样工作程序的具体实施及相关情况的协调处理。 2．采样人员必须到现场严格按采样程序进行采样，不得由被采样单位或他人取样后交采样人员。 3．采样人员按采样程序进行样品编号、封样及留样，采取样品的数量及质量应满足检测工作的需要。 4．采样人员应在现场认真逐项填写采样登记表，填写的采样信息应齐全、准确、字迹清楚，有可追溯性。经采样人员及被采样单位双方确认无误后在采样登记表上共同签字，或加盖公章。采样登记表共三联，第一联存根，第二联随待检样品，第三联交被采样单位保存。 5．所采取的样品其中一份（附采样登记表第三联），贴上封条后交被采样单位冷冻保存；另外两份样品（附采样登记单第二联），贴上标签封条后由采样人员尽快带回监测单位，防止样品变质。 6．采样过程如发生突发事件或出现严重问题时，采样人员应立即向本单位负责人汇报，不得擅自处理。 7．监测单位应对带回的样品及时进行认真检查，对封样情况、样品数量、质量、样品编号与采样登记表进行一一核对，检查合格后方可填单入库。 8．监测单位业务管理部门在样品入库后，应及时进行样品处理，做好留样工作，并安排检测工作。 9．采样人员应注意了解被采样单位的规模、防疫管理情况及动物来源等各种情况，并向本单位负责人汇报，以便进行总结和为上级部门提供参考信息。 （三）采样具体要求。 严格按照NY/T 541-2002《动物疫病实验室检验采样方法》进行动物疫病监测采样，做好采样工作。 1．血清样品。 家禽、犬每只采血2-3mL，猪、牛每头5-7mL，血液自然凝固后无菌分离血清装入灭菌小管中，密封后冷藏保存。 2．病原检测样品。 （1）禽流感：咽喉拭子采取时要将拭子深入喉头及上腭裂来回刮3～5次，取咽喉分泌液；取泄殖腔拭子时，将拭子深入泄殖腔转一圈沾取粪便；将咽喉拭子和泄殖腔拭子一起放入含有抗菌素的pH值为7.0～7.4的等渗磷酸盐缓冲液（PBS）内（无PBS可用25%～50%的甘油盐水）。组织和气管拭子悬液中应含有青霉素（2000IU/ml）,链霉素（2mg/ml）、庆大霉素（50pg/ml）和制霉菌素（1000IU/ml），但粪便和泄殖腔拭子所有的抗生素浓度应提高5倍。在室温放置1h～2h后样品应尽快处理，没有条件的可在4℃存放几天，也可于低温条件下保存（-70 （2）口蹄疫：样品以发病动物（牛、羊或猪）未破裂的舌面或蹄部、鼻镜、乳头等部位的水泡皮和水泡液最好。对怀疑带毒的动物可在屠宰后采集组织样品如淋巴结、脊髓、肌肉等作为检测材料。采集方法：未破裂水泡中的水泡液用灭菌注射器吸出后装入灭菌小瓶中（可加适量抗菌素），加盖并用胶带封口，严防进水，4℃～8℃冷藏；剪取新鲜水泡皮放入灭菌小瓶中，加适量50%甘油一磷酸盐缓冲液（pH7.4），加塞塞紧并用胶带封口，-30℃以下保存；在屠宰时采集猪颌下淋巴结等组织样品3g～5g装入洁净的食品塑料袋内，用封口机封口或结扎紧袋口后立即放入盛有冰块的保温瓶（箱）内。然后尽快送往 对非发病动物，采血液分离血清检测。 （3）猪瘟、高致病性蓝耳病及猪圆环病毒病：对病死猪（如流产的死胎）和扑杀猪（如弱胎猪），应立即采取肺、肾、扁桃体和淋巴结等组织数小块，置冰瓶内立即送检。 非病死猪，采血液分离血清检测。 （4）狂犬病： ①使用灭菌棉拭子（大棉签）采样，采样时，为保证采到足够的唾液（要求0.3毫升以上），可同时使用2—3支棉签，沾上少许食盐（以促进犬只的唾液分泌），由犬主进行操作，转动拭子采样，以1只犬的样品为单位分别放入带有PBS缓冲液的小塑料离心管中，盖上盖子，然后放在冰箱内冻结保存。 ②采集犬脑组织要求：取直径0.5mm吸管，沿枕骨大孔向一只眼的方向插入，边插边轻轻旋转至不能深入为止，捏紧吸管后端并拔出，管里即含有脑组织样品，一般一次可以采1ml左右，将含脑组织部分的吸管用剪刀剪下，连吸管一起放入含保存液的灭菌样品管中。同样的方法采三次，保证足够的脑组织样品。样品放入装有保存液（50%甘油/PBS（0.01mol/L，pH7.4），0.1g/L的硫柳汞）的离心管里，于-20℃