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畜牧兽医学报
奶牛圆形长形成熟精子细胞微量
制备和含量分析
任小霞 陈晓丽 李秀岭 王 艳 秦 彤 王 栋
中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部畜禽遗传资源与种质创新重点实验室北京
北京市大兴区动物疾病控制中心北京
摘 要本研究旨在探究奶牛变形精子细胞获取方法建立稳定奶牛精子 提取体系及分析单个生精细胞
含量变化采用激光显微捕获技术结合冰冻切片采集奶牛圆形长形精子细胞样品利用附睾尾精子浮游
法获得成熟精子通过对已报道的小鼠奶牛及人类精子 制备方法的尝试和比较获得 最佳奶牛
精子 制备方法并用 对圆形和长形精子细胞进行 制备筛选去除白细胞
上皮细胞等体细胞污染及基因组 污染的反转录聚合酶链式反应 检测方法并对生精细胞 含
量进行单因素方差分析结果表明激光显微切割技术可有效捕获圆形长形精子细胞通过 获得的牛
精子 纯度高质量好单个精子 含量为 同时随精子细胞变形其 含量显著降
低其中圆形精子到成熟精子 含量降低 倍本研究从复杂样品取样微量 细胞转录本制备与检测等
方面为精子发生与变形机理研究提供重要参考
关键词生精细胞转录本激光显微切割附睾表达
中图分类号 文献标志码 文章编号
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