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* 1球形胚 2心形胚 3犁形胚 4子叶期胚 5人工种子 6人工种子萌发 * 本章小结 组织培养、人工种子。 要点: 1.植物组织培养的理论基础是什么? 2.植物经组织培养的再生途径有哪两种? 3.激素在细胞分化中是如何调节器官分化的? 实践: 了解组培应用与市场新颖产品: 手指花卉、植物宠物/index.php?xname=VP5DO41 * 课后作业: 1. 自学:植物胚胎培养、植物脱毒技术 2. 结合应用举例,理解植物组织培养和人工种子的技术原理和操作过程。 3.视频:了解植物组织培养的相关实验操作 /u78/v_MjczMjc4NTE.html * 下节内容 动物人工繁殖 预习思考题: 体外受精动物与核移植动物相比各自有什么优缺点? * 问题与讨论 * 植物组织培养再生植物的应用举例1 * 培养技术 总路线:以寒兰种子萌发后形成的根状茎为外植体,对类原球茎诱导、增殖、分化。 1.材料:以寒兰种子萌发后形成的根状茎为外植体。 * NAA(萘乙酸):生长素 6-BA(6-苄基腺嘌呤):分裂素 3-3307(优康唑):生长调节剂(促进分蘖、抑制细胞伸长,矮化植物) sucrose(蔗糖) * * * * * 例2 海带愈伤组织培养 选择合适的外植体——叶状体下部细胞。 无菌处理——洗净、酒精消毒。 诱导愈伤组织培养。 * 叶状体下部组织——1 切割外植体 2 切割并洗净 3 酒精消毒 4 火焰消毒 5 切成小片 6-7 琼脂培养基培养 8 液体培养基培养 * 海带幼叶——1幼叶选择 2 外植体固体培养基培养 3 外植体生长 4 液体培养基培养 5 –6愈伤组织形成 7-8 新植株形成 * * 虽然海藻组织培养成果显著,但是仍然存在许多尚未解决的问题。海藻的愈伤组织由于诱导率低、生长缓慢及分化困难,很难像高等植物一样大规模用于养殖育苗和次生代谢产物的生产。 * 例3:人工种子应用举例 一品红又名圣诞花,是在元旦和圣诞节前夕观赏的一种著名盆栽花卉,属大朗科,常绿溜木。此花原产墨西哥及中美,现我国各地都有栽培。 * 一品红人工种子制作 一品红正常繁殖速度慢。 目前多以叶片、茎段为外植体诱导愈伤组织,在分步诱导芽湖根,生成苗。——器官发生途径。 这里以苞片为外植体,离体诱导体细胞胚,制作人工种子。体细胞胚具有双极性(一端为芽端、一端为根端),可以简化步骤。——体细胞胚途径。 注意不同生长素/分裂素比例对于体细胞胚诱导的影响。 2,4-D:2,4-二氯苯氧乙酸(生长素) 6-BA: 6-苄基腺嘌呤(分裂素)。 * 第一步 愈伤组织诱导——2,4-D/6-BA:比例较高时有利 * 第二步:体细胞胚诱导——降低生长素2,4-D浓度;活性炭 * 第三步:包埋与萌发——海藻酸钠法 * 1球形胚 2心形胚 3犁形胚 4子叶期胚 5人工种子 6人工种子萌发 * 不定根不是直接或间接由胚根所形成的,没有固定的生长部位,它不按正常时序发生。 在高等植物正常的个体发育中,芽一般是只从茎尖或叶腋等的一定位置生出。所以这种象顶芽、腋芽、副芽等均在一定部位生出的芽,称为定芽.与此相反,凡从叶、根、或茎节间或是离体培养的愈伤组织上等通常不形成芽的部位生出的芽,则统称为不定芽。 * 植物胚胎培养是指对植物的胚(种胚)及胚器官(如子房、胚珠)进行人工离体无菌培养,使其发育成幼苗的技术,包括胚培养、胚珠培养、子房培养、胚乳培养。 * * 虽然海藻组织培养成果显著,但是仍然存在许多尚未解决的问题。海藻的愈伤组织由于诱导率低、生长缓慢及分化困难,很难像高等植物一样大规模用于养殖育苗和次生代谢产物的生产。 海藻组织培养 * 其它一些有激素生理活性的物质,如:甾类、多胺类、水杨酸类等 五类植物激素 赤霉素:属于二萜类酸,由四环骨架衍生而得。赤霉素种类至少38种,广泛应用于农业生产。可刺激叶和芽的生长,提高产量。最突出的生理效应是促进茎的伸长和诱导长日植物在短日条件下抽薹开花。遗传上矮生的植物对赤霉素最敏感。 * (4)常见培养基 MS培养基:1962年穆拉辛格和斯库格为烟草细胞培养而设计,其中硝酸盐的浓度高,适合植物原生质体、细胞和组织培养。 B5培养基:1968年甘伯尔格为大豆细胞培养而设计,铵的浓度低,适合木本植物的组织和细胞培养。 * 培养基分类 富盐平衡培养基 是目前使用最广泛的一类,代表性的培养基有MS、LS、BL、BM、ER等。特点是:无机盐浓度高,微量元素种类齐全,浓度高;元素间比例适当,离子平衡性好,具有较强的缓冲能力、稳定性好、营养丰富,一般培养时无需再加入有机成分。 高硝态氮培养基
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