《中国兽药典》二〇一五年版一部解读.ppt

高效液相色谱法 方法转换 提示1：原方法中系统适用性试验*含分离度、灵敏度，比对转换前后方法测试结果，出峰顺序和个数均一致，系统适用性试验结果符合要求，定性和定量无需验证。*不含灵敏度，定性、定量、溶出度、含量均匀度测定无需验证；有关物质需验证灵敏度，达到对照（品）溶液二十分之一即可。 高效液相色谱法 方法转换 提示2：原方法中没有系统适用性试验要求，溶出度、含量均匀度无需验证；定性要求峰纯度、分离度满意即可；有关物质要求峰纯度、分离度满意，且灵敏度符合要求；定量（包括中药制剂）要求峰纯度、分离度满意即可；无法进行分离度比较，可进行2～3种条件强制破坏试验后进行测定，比较两者图谱，杂质个数和相对峰面积输出应基本一致。 气相色谱法 载气源：氦气、氮气、氢气。 注：新方法中应注明载气流速。 进样部分：溶液直接进样、自动进样、顶空进样。 注：顶空进样方法中，应注明平衡温度、平衡时间、传输线温度、定量环温度等。 色谱柱：填充柱、毛细管柱。 柱温箱：柱温 检测器：FID、ECD，等。 温度设置：柱、进样口（高于柱温30~50℃）、检测器（FID比柱温高，不低于150 ℃ ，通常为250~350 ℃ ） 兽药质量标准分析方法验证指导原则 需验证的情况：建立兽药质量标准、兽药生产工艺变更、制剂的组分变更、原分析方法进行修订。 验证项目：鉴别试验，限量或定量检查，原料药或制剂中有效成分含量测定，制剂中其他成分（如防腐剂等）测定，兽药溶出度、释放度中溶出量的测定。 验证指标：准确度、精密度（包括重复性、中间精密度和重现性）、专属性、检测限、定量限、线性、范围和耐用性。 在分析方法验证中，须采用标准物质进行试验。 兽药质量标准分析方法验证指导原则 ① 已有重现性验证，不需要验证中间精密度。 ② 如一种方法不够专属，可用其他分析方法予以补充。 ③ 视具体情况予以验证。 项 目 内 容 鉴 别 杂质测定 含量测定及 溶出量测定 校正因子 定 量 限 度 准确度 - + - + + 精密度 ? ? ? ? ? 重复性 - + - + + 中间精密度 - +① - +① + 专属性② + + + + + 检测限 - -③ + - - 定量限 - + - - + 线性 - + - + + 范围 - + - + + 耐用性 + + + + + 兽药质量标准分析方法验证指导原则 准确度：方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，一般用回收率（％）表示。 1、化学药含量测定 原料药：①对照品 ②与另一方法比较。 制剂： ①处方量空白辅料中添加对照品； ②制剂中添加对照品 ③与另一方法比较 准确度也可由所测定的精密度、线性和专属性推算出来。 兽药质量标准分析方法验证指导原则 2、化学药杂质定量测定 ① 原料药中添加已知杂质； ② 制剂处方量空白辅料中添加已知杂质； ③ 与另一方法比较； ④ 不加校正因子的主成分自身对照法计算。 3、中药化学成分测定 用对照品进行加样回收率测定，即向已知被测成分含量的供试品中再精密加入一定量的被测成分对照品，依法测定。 兽药质量标准分析方法验证指导原则 4、校正因子的准确度 绝对（或定量）校正因子是指单位面积的色谱峰代表的待测物质的量。待测物质与所选定的参照物质的绝对校正因子之比，即为相对校正因子。 相对校正因子可采用替代物（对照品）和被替代物（待测物）标准曲线斜率比值进行比较获得；采用紫外吸收检测器时，可将替代物（对照品）和被替代物（待测物）在规定波长和溶剂条件下的吸收系数比值进行比较，计算获得。 GC和HPLC的相对重量校正因子，正文项下描述为待测物峰面积与相对校正因子的乘积进行结果计算。 兽药质量标准分析方法验证指导原则 5、数据要求 ①同一浓度（相当于100%浓度水平），至少测定6份。 ②3种不同浓度（化学药1.2﹕1、1﹕1、0.8﹕1左右；中药1.5﹕1、1﹕1、0.5﹕1左右），每种3份测定。 应报告测定方法、测定结果和RSD%或置信区间。样品中待测成分含量和回收率限度关系可参考表2。 兽药质量标准分析方法验证指导原则 表2 样品中待测成分含量和回收率限度 待测成分含量 回收率限度（%）