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月季的花药培养经典.ppt

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植物的花药培养在育种上有什么意义? 花粉粒(1N) 单倍体植株(1N) 二倍体纯合子植株(2N) 缩短了育种周期,为新品种的培育开辟了新途径。 点此播放教学视频 花的结构 点此播放教学视频 花丝 花药:囊状结构,内有很多花粉 花粉是由花粉母细胞(即小孢子母细胞)经过减数分裂而形成的,因此,花粉是单倍体的生殖细胞。 花粉的发育要经历:四分体时期、单核期、双核期等阶段。 (一)被子植物的花粉发育 雄蕊 点此播放教学视频 (一)被子植物的花粉发育 点此播放教学视频 1花粉母细胞(2n) 4个小孢子(小孢子 四分体)(n) 减分 有分 1个花粉管细胞核(n) 1个生殖细胞核(n) 有分 2个精子 单核居中期(n) 单核靠边期(n) 点此播放教学视频 注意: ①二核花粉粒:成熟的花粉粒中,只含花粉管细胞核和生殖细胞核。(精子在花粉管中形成) ②三核花粉粒:有些植物的花粉,在成熟前,生殖细胞进行一次有丝分裂,形成两个精子,这样的花粉在成熟时,含有一个营养核和两个精子。 ③两个精子和一个营养核的基因型相同。 点此播放教学视频 (二)产生花粉植株的两种途径 形成原因:主要取决于培养基中的激素的种类及其浓度的配比 点此播放教学视频 体细胞胚(胚状体): 在组织培养过程中,某些体细胞在形态上转变为与合子发育成的胚非常相似的结构,发育过程亦与合子胚类似,被称为体细胞胚(胚状体)。 点此播放教学视频 (三)影响花药培养的因素 1、材料的选择 不同植物 同一植物的不同生理状况(花期早期-初花期) 合适的花粉发育期(单核居中期与靠边期之间) 此外,植株生长条件、材料低温预处理、接种密度等 2、培养基的组成 点此播放教学视频 实验操作 材料选取 材料和 消毒 接种和 培养 点此播放教学视频 (一)材料选取 通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。 最常用的方法:醋酸洋红法。 某些植物的花粉细胞核不易着色, 采用焙花青-铬矾法,这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。 月季的初花期。 选择合适的花粉发育时期也是提高诱导成功率的重要因素。一般来说,在单核期,细胞核由中央移向细胞一侧的时期,花药培养成功率最高。 点此播放教学视频 为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难? 答:花瓣松动后,微生物就可能侵入到花药,给材料的消毒带来困难。 点此播放教学视频 二、材料的消毒: 花蕾 (70%酒精) 大约30s (无菌水) 清洗 (无菌吸水纸) 吸干水分 (1%氯化汞溶液) 2~4min (无菌水) 冲洗 月季花蕾的消毒与菊花外植体的消毒相比较,二者有何不同? 在酒精消毒前,花药不需要预先用流水冲洗、洗衣粉洗涤和软刷刷洗 点此播放教学视频 三、接种和培养 剥取花药 接种花药 培养 分化培养基培养 鉴定和筛选 不要损伤花药? 要彻底除去花丝? 常常会出现染色体倍性的变化? 每个培养瓶接种 (7~10 ) 个花药? 花药长出愈伤组织还要转移到哪? 主要原因是营养核和生殖核融合造成的 点此播放教学视频 植物组织培养技术与花药培养技术的异同点 项目 相同点 不同点 植物组织培养    技术 离体的植物组织经脱分化形成愈伤组织,再分化成丛芽,诱导出根,然后进行移栽。 外植体为体细胞,染色体数无需加倍。 花药培养技术 取材为花药,培养的为单倍体幼苗,植株弱小,高度不育,必须用秋水仙素处理,使染色体加倍,恢复正常植株的染色体数,而且为纯种。 2、基因型为AaBb的水稻(24条染色体)的花药通过无菌操作,接入试管后,在一定条件下培养成试管苗。 (1)愈伤组织是花粉细胞分裂形成的不规则的细胞团,愈伤组织必须从培养基中获得( )( )和小分子有机物等营养物质。 (2)要促进花粉细胞的分裂分化,培养基中应有(   )(    )两种激素。 愈伤组织分化是指愈伤组织形成芽和根,由芽发育成叶茎。这一过程必须给予光照,其原因是(   )利用光能制造有机物促进试管苗生长发育。 (3)试管苗的细胞核中有(   )条脱氧核苷酸链。试管苗的基因型有: 水 无机盐 生长素 细胞分裂素 叶 24 AB

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