提高毛细管电泳(CE)实验的稳定性和重复性.doc

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BECKMAN COULTER Inc. 提高CE实验的稳定性与重复性 未涂层石英毛细管的预处理: 新毛细管的清洁与再生过程 1.1.a 甲醇(色谱纯) 20psi,5min 去除毛细管中的脂类物质 1.1.b 水(双蒸) 20psi,5min 去除甲醇 1.1.c 0.1N NaOH 20psi,15-30min 平滑毛细管内壁,再生硅羟基 1.1.d 水(双蒸) 20psi,5min 去除NaOH 1.1.e Buffer 20psi,10min 平衡毛细管 涂层毛细管的预处理: 0.1 N HCl 20psi,2min 再生毛细管 水(双蒸)20psi,2min 去除HCl,保持毛细管内的湿润 Buffer 20psi,5min 平衡毛细管 样品之间的冲洗平衡: 无表面活性剂使用: 3.1.a 进样前采用buffer 20psi,5-10min清洗,以保持毛细管的清洁及buffer与毛细管内壁的平衡 3.1.b 在运行10-20个样品之后需要更换新的运行缓冲液,并以0.1 NaOH 及双蒸水20psi,5min冲洗毛细管,去除毛细管内吸附物质,然后buffer 20psi,10min平衡毛细管 3.1.c 以上3.1.a-b无法保证实验的重复性则需要在每次进样前按下列步骤清洗毛细管: 0.1 NaOH 20psi,2min 双蒸水 20psi,2min Buffer 20psi,5-10min 有表面活性剂使用: 3.2.a进样前采用buffer 20psi,10min清洗,以保持毛细管的清洁及buffer与毛细管内壁的平衡 3.2.b 尽量避免使用NaOH冲洗毛细管 3.2.c 当发生基线不稳定或出峰时间不稳定时则需要使用0.1 NaOH冲洗,但使用NaOH冲洗后必须使用buffer长时间平衡毛细管 实验结束后的毛细管处理: 无涂层石英毛细管 实验结束后不再使用: 4.2.a 双蒸水 20psi,5min 4.2.b 空瓶 20psi,5min 实验结束后24小时内再次相同条件使用: 4.3.a buffer 20psi,10min 4.3.b 保持毛细管两端浸泡在buffer中 4.2.c 再次使用前buffer 20psi,10min冲洗 基线或实验结果异常的处理: 无涂层毛细管: 5.1.a 依次使用4.2.a-b,1.1.a-e步骤处理 5.2 涂层毛细管: 5.2.a 0.1N HCl 20psi,2min 5.2.b 双蒸水 20psi,2min 5.2.c Buffer 20psi,2min 5.2.d 使用标准样品测试毛细管性能 其他需注意的方面: 电极的清洁: 经常使用的仪器需要间隔7-14日清洁一次电极,依次采用蘸水棉球和酒精棉球擦洗电极 6.2 2ml玻璃瓶装溶液后必须用纸将内瓶口擦干后再盖红色的盖子

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