流式细胞术在临床科研中的应用.pptVIP

基于流式细胞术的单细胞分析 在临床及科研中的应用;(一) 流式细胞术的概念 流式细胞术(flow cytometry,FCM)是利用流式细胞仪对生物颗粒包括细胞(红细胞、白细胞、各类组织细胞、血小板等)、微生物以及人工合成微球的多种物理和生物学特性进行定量分析，并能对特定细胞群体加以分选的细胞参量分析技术。;(二) FCM的工作原理 1.荧光染色 (1) 用荧光染料直接染色，如：PI (2) 用荧光抗体间接染色，FITC,PE 2.液流技术：细胞悬液被吸入检测室后，在鞘液的约束下，通过喷嘴，使其形成单细胞悬液。 3.激光技术： 散射光信号 (FS、SS) 荧光信号 (FL1、FL2、FL3、FL4) 4.数据处理;;;;;流式细胞仪检测平台的独特之处;肿瘤学应用（1）-DNA及细胞周期分析;肿瘤学应用（2）-膜抗原分析;肿瘤学应用（3）－细胞凋亡分析;肿瘤的临床应用;DNA细胞周期分析与临床应用; 利用特殊的荧???染料与细胞内DNA碱基结合，被荧光染料染色的细胞在激光照射下发射出荧光，荧光强度与DNA含量成正比。 流式细胞仪通过测定细胞的荧光强度推算出细胞的DNA含量，解析细胞周期。;DNA检测常用荧光染料;DNA细胞周期分析参数;DNA的倍体和DNA指数的关系;FCM在肿瘤学中的应用-血液标本;FCM在肿瘤学中的应用-脱落细胞