春石斛兰试管苗生产技术规程.docxVIP

春石斛兰试管苗生产技术规程 张秀珊 曾宝踏 郭英铎 洪生标 郑运欢 柳江海 黄 广东省汕头市农业科学研究所 摘要： 详细介绍春石斛兰试管苗生产过程屮的基本设施与技术、播种苗的生产、分生苗 的生产、炼苗、瓶苗质量、包装与运输等内容，总结春石斛兰试管苗生产的技术 规程，为春石斛兰试管苗生产者和组培爱好者提供参考。 关键词： 春石斛兰;试管苗生产;技术规程; 作者简介：张秀珊(1972-)，女，高级农艺师;主要从事花卉选育种及组培技术 研究。 作者简介：柳江海，高级农艺师。E-ma订:nkyljh@126. com 春石斛兰(Dendrobium)为兰科(Orchidaceae)石斛属多年牛草木植物，茎叶 美丽，花色艳丽多姿，花香怡人，花期持久，具有极高的观赏价值。近年来，春 石斛兰盆花已成为我国大陆继蝴蝶兰Z后的又一高档礼品花卉，具有非常广阔 的发展前景。 1基本设施与技术 1基本设施设备 1. 1基本设施 交通方便、环境清洁、空气干燥的生产配套场所一一洗涤室、试剂室、培养基配 置室、灭菌室、培养基冷却室、接种室、培养室、炼苗大棚等。 1.2基本设备 安全、高效的生产配套设备一一洗瓶机、培养基分装机、高压蒸汽灭菌炉、烘干 箱、超净工作台、天平、冷暖空调、培养架、培养瓶、紫外线灯、常用玻璃仪器、 接种盘、接种刀、蹑子、高温灭菌器、酒精灯等，以及所需的化学试剂。 1?2常用技术 2. 1培养基配制 按培养基的配方及所需数量分别加入各类物质，混合后倒入培养基分装桶中， 用纯净水定容至所需体积，加热搅拌至完全溶解并充分混合后，用1 mol/L的 Na OH溶液调节p H值至所需酸碱度，再趁热用培养基分装机将培养基分装入培 养瓶中，塞上瓶塞或盖上瓶盖。 2. 2灭菌 培养基。在高压蒸汽灭菌炉内用湿热空气灭菌法(压力0.1广0.14 MPa、 120~126°C、15~20 min)进行灭菌。 接种工具。接种盘可随培养基一起灭菌，灭菌后用烘干箱烘干，待用；银子 与接种刀在接种过程中，采用酒精灯灼烧或高温灭菌器进行灭菌。 外植体。用0. l%Hg CI2溶液或10%Na Cl 0溶液浸泡处理，不同外植体采用 不同的消毒方法和消毒吋间。 其他。接种室、培养室用紫外线灯或臭氧等杀菌;接种台、手等用75%酒精 涂擦杀菌。 2. 3接种 在超净工作台上，摆放好接种工具，用蹑子将需要接转的材料取岀置于接种盘 上，用银子和接种刀将材料进行适当切割，再用银子将切割好的材料插植到新 的培养基中。操作吋要注意对瓶口及瓶塞进行灼烧，然后及口寸塞上瓶塞，盖上防 尘盖。银子和接种刀每转1瓶材料后，用酒精灯灼烧或高温灭菌器进行灭菌，接 种盘每转1瓶材料更换1个，以防止污染。 2播种苗的生产 2.1种子的获得 1. 1选择亲本 根据生产需要或育种目标，选择花色、花型、开花习性好，且生物学特性、生长 习性、环境适应性、植株长势等表现较好的优良单株作亲本。 2.1.2人工授粉 吋间。开花第1 d花粉萌发力最强，开花后7 d花粉块仍具活力，母本最好 的授粉时间在开花后3?4 do 一天中最佳授粉时间为9 : 00~10 : 00o 授粉。先将母本的花粉块除去(去雄)，再将采集的父本花粉块用小蹑子蹑 起轻轻放在母本的蕊腔中。用铅笔写好标牌，注明父母亲本、授粉日期等。 1.3采收 授粉后，应经常观察授粉花朵的变化并防止损坏，加强肥水管理。约150^180 d 后，在葫果尚未裂开时采收。 2?2播种 2. 1萌果处理 春石斛兰种子以随采收随播种为好。釆收冋来的萌果，先用剪刀将残存的花器官 仔细剪去，然后用75%酒精棉花将茹果表面的灰尘、残留肥料、农药等擦拭干净, 再在超净工作台上用0. l%Hg Cl?溶液或10%Na Cl 0溶液浸泡10~15 min,用无 菌水冲洗4?6次。 2. 2播种 在超净工作台上将己消毒好的葫果放在无菌接种盘上，用灭菌后的银子银住踴 果，用接种刀切开，将种子均匀播撒于事先准备好的培养基中。 2. 3培养 Hyponex No. 1 2 g/L+胰蛋白腺 2 g/L+活性炭 1 g/L+香蕉泥 30 g/L+2%蔗糖+0. 6% 琼脂，p H值5?4±0. 2。 2. 4培养条件 培养温度为(26土2) °C,前期暗培养或有散射光即可。在种子萌发生长并转至 黄绿色时，光照强度可增加至800^1 000 lx,光照时间8 h/do 2.3分瓶 2. 3. 1培养基 Hyponex No. 1 2 g/L+胰蛋白腺 2 g/L+活性炭 1 g/L+香蕉泥 40 g/L+2%蔗糖+0. 6% 琼脂，p H 值 5.4 土 0.2。 3. 2培养条件 培养温度为(26±2) °C,光照强度1 000~1 500 lx,光照时间8 h/d。 播种约60~80 d后