桦褐孔菌水提取物对糖尿病豚鼠降低血糖血脂作用的研究.docVIP

桦褐孔菌水提取物对糖尿病豚鼠降低血糖血脂作用的研究 1258陕西中医2010年第31卷第9期 桦褐孔茵水提取物对糖尿病豚鼠降低血糖血脂作用的研究 李天洙许青松崔永延边大学医学部基础医学院(延吉133000) 摘要目的:通过桦褐孔茵水提取物对糖尿病豚鼠的糖,脂代谢指标等表达的影响,初步探讨桦 褐孔茵水提取物治疗糖尿病的机理.方法:选用成年雄性豚鼠48只,每组8只,随机分为 正常组,桦褐孔茵小剂量组,中剂量组,大剂量组,阴性对照组及阳性对照组.链脲佐菌素 (STZ)腹腔注射制作豚鼠糖尿病模型,灌胃桦褐孔茵水提取物,治疗前及治疗8周后,分 别内眦静脉及心脏取血测定空腹血糖(FBG),糖化血红蛋白(HbAlc),甘油三酯(TG),总 胆固醇(TC),低密度脂蛋白胆固醇(LDL—C),高密度脂蛋白胆固醇(HDL—C),取肝脏,蛋 白质印迹法测定葡萄糖分解代谢关键酶葡萄糖激酶(GK,己糖激酶Ⅳ)及胆固醇合成关 键酶羟甲基戊二酸单酰CoA还原酶(HMGCoA还原酶)的表达.结果:桦褐孔菌水提取 物治疗组FBG,HbAlc,TG,TC,LDL—C和HDL—C水平明显下降,GK表达增高,HMG CoA还原酶的表达降低,并且表现剂量梯度依赖.结论:桦褐孔茵水提取物对糖尿病豚鼠 FBG,HbAlc,TG,TC,LDL—C和HDL—C水平的降低具有明显的效果,可能和桦褐孔茵 水提取物通过增强GK的表达和降低HMGCoA还原酶的表达,促进葡萄糖的分解和减 少胆固醇的合成过程相关. 主题词糖尿病/中医药疗法@桦褐孔菌豚鼠甘油三脂实验研究 【中图分类号】R587【文献标识码】A【文章编号】1000—7369(2010)09—1258～03 桦褐孔菌(Inonotusobliquus,Chaga),主要分布于北纬45 ～ 5O度的地区,如北美,芬兰,波兰,俄罗斯,日本等国家和地 区,在我国主要分布在黑龙江和吉林省长白山地区,民间广泛 用于防治癌症等多种疑难杂症[1].桦褐孔菌提取物具有很多生 物活性,如增强免疫力,抗肿瘤,抗病毒(主要是HIV),抗氧化, 抑制血小板聚集,抗炎,抗损伤等作用.本实验通过测定糖尿病 豚鼠FBG,HbAlc,TG,TC,LDL—C和HDL—C等糖,脂代谢生 化指标及GK,HMGCoA还原酶表达,初步探讨桦褐孔菌水提 取物纠正糖尿病豚鼠糖,脂类代谢紊乱的生物化学机制,为桦 褐孔菌的临床应用提供理论依据. l实验材料1.1动物雄性豚鼠80只,体重4Oo～ 500g,由延边大学医学部实验动物科提供. 1.2实验用药桦褐孔菌水提取物,由延边圣林菌业有 限公司提供. 1.3实验试剂STZ(美国Sigma公司),蛋白质提取纯 化试剂盒(Biossp1250),GK和HMGCoA还原酶单克隆抗体 (SantaCruz,uSA);其他试剂均应用国产优级纯试剂. 1.4实验仪器全自动生化分析仪(日立7600),糖化血 红蛋白分析仪(SysmexGT),电泳装置(Bio—rad). 1.5统计学方法数据以均数±标准差表示(±s),实 验前后数据比较采用t检验,各组间进行单因素方差分析.实 验数据处理均用SPSS16.0统计软件进行统计分析. 2实验方法与结果2.1制作糖尿病豚鼠模型糖尿 病豚鼠模型制备采用杨丽萍等方法_2],取FBG≥8.83mmol/L 者作为糖尿病成模标准.取造模成功的糖尿病豚鼠48只(本实 验造模成功54只),按血糖和体重随机分为阴性对照组(模型 组),桦褐孔菌水提取物小剂量组,中剂量组,大剂量组及阳性 对照组(盐酸二甲双胍治疗组),每组各8只,桦褐孔菌小剂量 组,中剂量组,大剂量组分别灌胃桦褐孔菌水提取物300mg/ kg,600mg/kg,900mg/kg.阳性对照组灌胃盐酸二甲双胍 200mg/kg,正常对照组和糖尿病模型组每天灌胃相同剂量的 蒸馏水1次,连续8周.实验期间饲以标准饲料,自由饮水及新 鲜蔬菜.实验前取眦静脉测定各组FBG,TG,TC,LDL—C和 HDL—C水平.实验8周后,各组禁食不禁水12h,麻醉后心脏取 血测量FBG,HbAlc,TG,TC,LDL—C和HDL—C水平,取豚鼠 肝脏,蛋白质印迹法测定GK和HMGCoA还原酶的表达,以 B—actin作为内参对照. 2.2实验组FBG和HbAlc的变化实验前后相比较, 阳性对照组的FBG水平显着下降(Plt;o.01),桦褐孔菌水提取 物大,中剂量组的FBG均明显下降(Plt;O.05);实验后与阴性 对照组比较,阳性对照组的FBG水平显着下降(Plt;O.01),桦 褐孔菌水提取物大,中剂量组的FBG均明显下降(尸lt;O.05), 与阴性对照组比较,阳性对照组和桦褐孔菌水提取物大,中剂 量组的HbAlc均明显下降(Plt;O.O5),并表现出浓度梯