实验七动作电位.docVIP

西南大学理论与实验课教案首页 第7次课授课时间2013年5月22日第1～3节课课教案完成时间2013年4月10日 第7次课授课时间2013年5月22日第9～11节课 课程名称 动物生理学实验 教员 孙卫忠 职称 讲师 专业层次 动物科学1.2班 年级 2011 授课方式 实验课 学时 3 授课题目（章，节） 实验七动作电位记录 基本教材、主要参考书 和相关网站 教材：《动物生理学实验》（第2版），杨秀平.肖向红主编，高等教育出版社，2009年 相关网站：生理科学实验网站：jpkc.zju.edu.cn/k/554/ 教学目标与要求： 了解：基本电生理方法和原理；神经干复合动作电位的记录原理（细胞外记录） 理解：电刺激方法的应用；刺激和反应：坐骨神经干动作电位的记录原理； 掌握：神经干复合动作电位的引导、传导速度和不应期测定方法 教学内容与时间分配： 讲解动作电位记录相关理论，重点讲述实验操作步骤和注意事项（10分钟） 观看实验录像并同时点出实验中的重点和注意事项（10分钟） 学生自行操作（90分钟） 小结（10分钟） 教学重点与难点：重点：阈刺激和最适刺激的概念；骨骼肌不同收缩形式的形成机制；神经干复合动作电位的记录和分析 难点：神经干复合动作电位与单根神经干动作电位的区别 教学方法与手段：讲解动作电位记录实验10分钟，放视频观看具体操作步骤，学员操作。利用图片和板书相结合的方法重点讲述实验原理、实验步骤和注意事项。通过本次实验使学员验证阈刺激和最适刺激的概念；掌握神经干复合动作电位的引导、传导速度和不应期测定方法。 西南大学理论与实验课教案续页 基本内容 教学方法手段 和时间分配 实验七 动作电位记录 二．动作电位记录 （一）实验目的和原理 目的： 学习神经干标本的制备。 2．观察坐骨神经干单相动作电位,双相动作电位、双向性传导并测定其传导速度。 学习绝对不应期和相对不应期的测定方法。 原理： 1．在静息电位的基础上，给细胞一个适当的刺激，可触发其产生可传播的膜电位波动，即动作电位。 ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － － － － － － － － － － － － － － － － － － － － － － － － － － － － － － ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － － － － ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － － － － 神经干动作电位是由许多这种兴奋性不同的单根神经纤维的动作电位综合成的复合性电位变化。 因此，不同于单根神经纤维的动作电位，神经干动作电位的电位幅度在一定范围内可随刺激强度的增加而加大 单根纤维动作电位 神经干复合动作电位 记录方式 细胞内记录：应用微电极在细胞膜内、外跨膜引导 细胞外记录：应用大电极在神经干表面两点间引导 电位幅度 大（70-90mV) 小（20mV） 电位与刺激的关系 “全或无” 达到阈刺激后，在一定范围内，电位大小随刺激强度增大而增大 性质 单个细胞动作单位：兴奋处膜内、外的电位差 为多根神经纤维动作电位的综合：神经干兴奋部位与未兴奋部位之间的电位差 记录放大器刺激器 记录放大器 刺激器 地地 地 地 －+ － + r-R+ r- R+ i+i- i+ i- 损伤区兴奋区细胞外引导电极 损伤区 兴奋区 细胞外引导电极 检流计 2．神经纤维的生理特性之一是具有高度的传导性。不同类型的神经纤维传导速度不同，其传导速度主要受神经纤维的粗细、内阻及有无髓鞘的影响。如测得神经冲动在神经干上传导的距离与时间，可根据距离(s)、时间(t)、速度(v)三者之间的关系式求出神经冲动传导速度， 即v=s/t。两栖类的坐骨神经是混合神经，包含多种粗细不等的神经纤维，其直径约为3—29μm。坐骨神经中以A类纤维为主，传导速度约为35—40m/s。 3．神经组织在接受一次刺激产生兴奋后，其兴奋性将会发生规律性的变化，依次经过绝对不应期、相对不应期、超常期和低常期，然后回到正常水平。采用两次脉冲，通过调节两次脉冲间隔，可测得坐骨神经的绝对不应期和相对不应期。 相对不应期绝对不应期 相对不应期 绝对不应期 采用双刺激模式，逐步增加波间隔 第二个动作电位出现时的刺激间隔及第二个动作电位振幅刚开始与第一个相等时的刺激间隔 （二）实验操作及器材1．实验对象：蟾蜍 2．实验器材：蛙类手术器械一套，任氏液，生物信号采集处理仪。 备蟾蜍坐骨神经干标本的制备 仪器连接及参数设定。 （三）操作注意事项 1．神经尽可能分离得长一些 2．标本制备时要注意保持标本的湿润 3．标本制备时尽量避免使用尖锐的器械，以免损伤神经 4．使用电刺激时，刺激强度不宜太大，否则可能导致神经的损伤 5．注意接地，防止干扰 （四）观察项目 1．双相动作电位 2．神经兴奋传导