生物技术在食品致病微生物检测中的应用.pptVIP

食品中致病微生物的检测技术 食品中致病微生物的检测技术 分子生物学技术运用到有食品检测方面，主要是针对一些有害微生物的核酸进行研究通过核酸杂交和核酸合成等反应快速检测样品中是否含有特定的有害微生物，并进一步确定其含量，其中最主要的技术包括PCR技术、DNA探针技术和基因芯片技术。 1.聚合酶链反应（PCR） （1）传统PCR技术 聚合酶链反应( polymerase chain reation, PCR)是1985年诞生的一项体外扩增DNA的方法，是在模板DNA、引物和四种脱氧核糖核苷酸存在的条件下，依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应，体外扩增特异DNA片段的技术。通过对人工难以培养的微生物相应DNA 或RNA 片段的扩增，检测扩增产物含量，从而快速的对饲料中致病菌含量进行检测。 李秀娟等（2009年）对117 株金黄色葡萄球菌的nuc片段进行了PCR 扩增和焦磷酸测序，结果显示所建立的PCR 方法能对117 株金葡菌进行准确检测，焦磷酸测序结果的一致性进一步验证了PCR 扩增结果的特异性，说明该方法针对目前所用的研究菌株而言，尚未出现假阳性和假阴性结果，具有较高的特异性。 传统PCR技术在实际应用中表现出一些缺陷，例如只能定性而不能定量地检测，且在有死细菌存在的情况下容易产生假阳性、不能检测致毒微生物产生的毒素等。 随着各项新技术的出现以及与PCR技术的有机结合，发展起来了一