水污染控制工程第六章模型.pptVIP

vmax n=0 0n1 n=1 KS 底物浓度[S] 1/2 vmax 酶反应速度 v 中间产物假说： 酶促反应分两步进行，即酶与底物先络合成一个络合物（中间产物），这个络合物再进一步分解成产物和游离态酶，以下式表示： 式中，S代表产物，E代表酶，ES代表酶－产物中间产物（络合物），P代表产物。 从上式可以看出，当底物S浓度较低时，只有一部分酶E和底物S形成酶-底物中间产物ES。 此时，若增加底物浓度，则将有更多的中间产物形成，因而反应速度亦随之增加。 当底物浓度很大时，反应体系中的酶分子已基本全部和底物结合成ES络合物。 此时，底物浓度虽再增加，但无剩余的酶与之结合，故无更多的ES络合物生成，因而反应速度维持不变。 1913年前后，米歇里斯和门坦提出了表示整个反应中底物浓度与酶促反应速度之间关系的式子，称为米歇里斯－门坦方程式，简称米氏方程式，即： 式中:v——酶促反应速度；vmax——最大酶反应速度； ρS——底物浓度； Km——米氏常数。 此式表明，当Km和vmax已知时，酶反应速度与酶底物浓度之间的定量关系。 由上式得： 该式表明，当vmax/v=2或v=1/2vmax时，Km=ρS，即Km是v=1/2vmax时的底物浓度，故又称半速度常数。 米 氏 方 程 式 ⑴当底物浓度ρS很大时，ρS?Km，Km+ρS≈ρS，酶反应速度达到最大值，即v=vmax,呈零级反应，在这种情况下，只有增大底物浓度，才有可能提高反应速度。 实际应用时，我们采用了微生物浓度cx代替酶浓度cE。通过试验，得出底物降解速度和底物浓度之间的关系式，类同米氏方程式，如下： 式中：Ks为饱和常数，即当时的底物的浓度，故又称半速度常数。 ⑵当底物浓度ρS较小时，ρS?Km，Km+ρS=Km，酶反应速 度和底物浓度成正比例关系，即 呈一级反应。此 时，增加底物浓度可以提高酶反应的速度。但随着底物浓度的增加，酶反应速度不再按正比例关系上升，呈混合级反应。 米 氏 常 数 的 意 义 米氏常数Km是酶反应处于动态平衡即稳态时的平衡常数。具有重要物理意义： Km值是酶的特征常数之一，只与酶的性质有关，而与酶的浓度无关。不同的酶，Km值不同。如果一个酶有几种底物，则对每一种底物，各有一个特定的Km。并且，Km值不受pH及温度的影响。因此，Km值作为常数，只是对一定的底物、pH及温度条件而言。测定酶的Km值，可以作为鉴别酶的一种手段，但必须在指定的实验条件下进行。 同一种酶有几种底物就有几个Km值。其Km值最小的底物，一般称为该酶的最适底物或天然底物。如蔗糖是蔗糖酶的天然底物。 1/Km可以近似地反映酶对底物亲和力的大小，1/Km愈大，表明亲和力越大，最适底物与酶的亲和力最大，不需很高的底物浓度，就可较易地达到vmax。 米 氏 常 数 的 测 定 对于一个酶促反应，Km值的确定方法很多。实验中即使使用很高的底物浓度，也只能得到近似的vmax值，而达不到真正的vmax值，因而也测不到准确的Km值。为了得到准确的Km值，可以把米氏方程的形式加以改变，使它成为直线方程式的形式，然后用图解法定出Km值。 目前，一般用的图解求Km值法为兰微福－布克作图法或称双倒数作图法。此法先将米氏方程改写成如下的形式，即： 实验时，选择不同的ρS，测定对应的v。求出两者的倒数，作图即可得出如下图的直线。量取直线在两坐标轴上的截距1/vmax和 -1/Km ，就可以求出Km及vmax。 米 氏 常 数 的 测 定 第五节 莫诺特（Monod）方程式 微生物增长速度和微生物本身的浓度、底物浓度之间的关系是废水生物处理中的一个重要课题。有多种模式反映这一关系。当前公认的是莫诺特方程式： 式中：ρS——限制微生物增长的底物浓度，mg/L； μ——微生物比增长速度，即单位生物量的增长速度。 式中：ρX——微生物浓度，mg/L； μmax —— μ的最大值，底物浓度很大，不再影响微生物 的增长速度时的μ值； KS——饱和常数。 在一切生化反应中，微生物的增长是底物降解的结果，彼此之间存在着一个定量关系。现如以dρS（微反应时段dt内的底物消耗量）和d ρX（dt内的微生物增长量）之间的比例关系值，通过下式表示