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酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸.ppt
第十二章 蛋白质化学 * * 第五节 蛋白质分类 1.按化学组成分 2.按对称性分 单纯蛋白 结合蛋白 球状蛋白 纤维状蛋白 第十二章 蛋白质化学 * * 三、蛋白质的三级结构 概念:是蛋白质分子中所有原子(主链+侧链)的空间位置关系 作用键: 疏水键、 离子键、 氢键、 范得华引力、 二硫键 第十二章 蛋白质化学 * * 二硫键 极性基团 离子键 蛋白质三级结构: 第十二章 蛋白质化学 * * 四、蛋白质的四级结构 两个或两个以上独立三级结构的多肽链 通过次级键结合而形成的空间结构 亚基 疏水键、氢键、盐键 概念: 第十二章 蛋白质化学 * * 血红蛋白的四级结构 第十二章 蛋白质化学 * * 蛋白质1-4级结构 第十二章 蛋白质化学 * * 五、维持蛋白质构象的主要作用力 离子键 疏水键 二硫键 氢键 范德华力 第十二章 蛋白质化学 * * 第十二章 蛋白质化学 * * 蛋白质一级结构的作用键? 二级结构的作用键? 三级结构的作用键? 四级结构的作用键? 第十二章 蛋白质化学 * * 第三节 蛋白质结构与功能的关系 第十二章 蛋白质化学 * * 血红蛋白结构与功能 正常β链: H-缬—组—亮—苏—脯—谷—谷— 贫血β链: H-缬—组—亮—苏—脯—缬—谷— 第十二章 蛋白质化学 * * 第十二章 蛋白质化学 * * 第十二章 蛋白质化学 * * 第四节 蛋白质的理化性质与分离纯化 第十二章 蛋白质化学 * * 一、蛋白质的理化性质 (一)蛋白质的一般性质 1.呈色反应 2.紫外吸收特征 3.两性电离与等电点 (二)蛋白质的高分子性质 4.蛋白质的胶体性质 5.蛋白质的变性与复性 第十二章 蛋白质化学 * * (1)双缩脲反应: Cu2+ 蛋白质 紫色络合物 OH- 原理:利用蛋白质分子中的肽键CO-NH 540nm比色分析 1.呈色反应 第十二章 蛋白质化学 * * (2) Folin-酚试剂反应: 磷钨酸 蛋白质 蓝色化合物 磷钼酸 650nm比色分析 原理:利用蛋白质分子中含有酚性羟基的酪氨酸等 第十二章 蛋白质化学 * * (3) 考马斯亮蓝反应: 考马斯亮蓝(G-250) 蛋白质 蓝绿色 595nm比色分析 第十二章 蛋白质化学 * * 2.紫外吸收特征 蛋白质的紫外吸收:λ=280nm (色氨酸、酪氨酸)(苯丙氨酸260nm) 在一定范围内,紫外吸收与蛋白质浓度成正比 摩尔吸光度(M-1cm-1) 10,000 1000 100 10 200 250 300 波长(nm) Trp Phe Tyr 第十二章 蛋白质化学 * * 3. 两性电离和等电点 带负电荷 净电荷为零 带正电荷 第十二章 蛋白质化学 * * 蛋白质所带正负电荷相等时溶液的PH值 即该蛋白质的等电点 电泳 带电粒子在电场中向相反电极移动的现象 等电点 利用电泳可将不同等电点的蛋白质分离开 第十二章 蛋白质化学 * * 4.蛋白质的亲水胶体性质 透析可分离纯化蛋白质 破坏电荷和水化膜,蛋白质沉淀 稳定因素:同种电荷和水化膜 分子大小:1~100nm,具胶体性质 超速离心可沉降蛋白质 第十二章 蛋白质化学 * * 蛋白质颗粒表面的水化膜和电荷 第十二章 蛋白质化学 * * 5.蛋白质的变性与复性 变性:理化因素影响→蛋白质空间构象破坏→蛋白质理化性质改变,生物学活性丧失 理化因素:加热、紫外线、强酸强
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