海蜇胶原蛋白肽的免疫活性的研究.PDF

第30卷第6期 水产 科 学 V01．30NO．6 2011年6月 FISHERIESSCIENCE Jun．2011 海蜇胶原蛋白肽的免疫活性的研究 丁进锋，苏秀榕，李妍妍，高 翔，岳福鹏，蒋 鑫 (宁波大学生命科学与生物工程学院，浙江 宁波315211) 摘要：用酶解海蜇胶原蛋白得到海蜇胶原蛋白肽研究其对小鼠的免疫调节作用。给小鼠灌胃海蜇 胶原蛋白肽，测定了免疫器官指数，巨噬细胞吞噬功能，脾淋巴细胞增殖功能等免疫功能指标。试验结 果表明，高剂量海蜇胶原蛋白肽能明显提高小鼠的碳廓清指数K、吞噬指数n和脾脏指数，显著促进伴 刀豆球蛋白诱导的T淋巴细胞增殖。 关键词：海蜇；胶原蛋白肽；免疫 中图分类号：$986．2 文献标识码：A 文章编号：1003-1111(2011)06—0359-03 海蜇(Rhopilemaesculentum)不仅是宴席佳瓜蛋白酶，55℃、pH6．5条件下水解3h，100℃水 肴，也是一味治病良药。海蜇富含一些具有生物活 浴灭酶10rain，冷却后4500r／min离心15min，上 性的物质，如胶原蛋白、毒素、糖胺聚糖、糖蛋白 清液即为海蜇胶原蛋白酶解液，一20℃保存备用。 等‘1一引，其中胶原蛋白的含量最为丰富嘲。 多肽含量采用双缩脲法测定。 研究表明，水解胶原蛋白的主要产物胶原多 1．3．2胶原蛋白肽对小鼠免疫活性的影响 肽，具有保护胃黏膜、抗溃疡、抑制血压上升，促进 1．3．2．1动物分组及给药 骨形成、皮肤胶原代谢等营养及生理功能，在食品 及医药等领域具有巨大的开发前景[6。7]。目前尚未 机分为5组，每组10只。正常对照组(NG)，灌胃 见到有关海蜇胶原蛋白肽对小鼠(Musmusculus)蒸馏水；低剂量组(CL)，灌胃10mg／kg胶原蛋白 免疫活性影响的报道，因此笔者采用响应面设计法 肽；中剂量组(CM)，灌胃50mg／kg胶原蛋白肽；高 制备海蜇胶原蛋白肽，研究了海蜇胶原蛋白肽对小 剂量组(CH)，灌胃i00 mg／kg胶原蛋白肽，每只灌 鼠免疫活性的影响，旨在为海蜇生物活性物质进一 胃量为10 步研究提供依据，为其在功能食品及医药等方面的 旋藻(Spirulina)800mg／(kg·d)，30d后处死小 应用提供基础。 鼠，测定各指标。 1．3．2．2对小鼠免疫器官质量的影响 1材料与方法 末次灌胃24h后，称取小鼠体质量，颈椎脱臼 1．1试验动物 处死。摘取胸腺、脾脏，吸干血迹后称其湿质量，胸 ICR小鼠购自浙江省实验动物中心。 腺(脾脏)指数[8]按下式计算。 1．2主要试剂与仪器 木瓜蛋白酶，广西庞博生物；RPMll640细胞 1．3．2．3对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响 培养液、小牛血清、刀豆蛋白A、MTT、庆大霉素， 末次灌胃24h后，尾部静脉注射0．1ml／lOg sigma公司；200目筛网，24孔培养板，96孔培养 rain 印度墨汁(用生理盐水稀释4倍)，分别在2 板，手术器械，二氧化碳培养箱，酶联免疫检测仪， (T。)和10